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张凤雪

作品数:2 被引量:13H指数:1
供职机构:浙江农林大学亚热带森林培育国家重点实验室更多>>
发文基金:浙江省自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
相关领域:农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 2篇农业科学
  • 1篇生物学

主题

  • 2篇毛竹
  • 1篇原核
  • 1篇原核表达
  • 1篇原核表达纯化
  • 1篇生物胁迫
  • 1篇特异性表达
  • 1篇转基因
  • 1篇组织特异性
  • 1篇组织特异性表...
  • 1篇胁迫
  • 1篇辛糖
  • 1篇林木
  • 1篇林木育种
  • 1篇林木育种学
  • 1篇克隆
  • 1篇基因
  • 1篇功能分析
  • 1篇核表达
  • 1篇合酶
  • 1篇非生物

机构

  • 2篇浙江农林大学

作者

  • 2篇张智俊
  • 2篇肖冬长
  • 2篇王超莉
  • 2篇徐英武
  • 2篇张凤雪
  • 1篇杨丽
  • 1篇屈亚平

传媒

  • 1篇遗传
  • 1篇浙江农林大学...

年份

  • 1篇2014
  • 1篇2013
2 条 记 录,以下是 1-2
排序方式:
毛竹KDO8PS的原核表达纯化及晶体生长被引量:1
2014年
3-deoxy-D-manno-octulosonate(KDO)8-phosphate synthase(KDO8PS)[EC 4.1.2.16]是KDO生物合成途径中的关键酶。采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,以毛竹Phyllostachys edulis新鲜实生苗为材料,分离得到竹子KDO8PS基因。通过对不同物种来源的KDO8PS进行氨基酸序列比对分析和半定量RT-PCR技术对该基因进行组织特异性表达分析。将PeKDO8PS基因构建入原核表达载体pET-28a,并在大肠埃希菌Escherichia coli原核表达系统中获得了KDO8PS的可溶性高表达。经nickel亲和层析和分子筛纯化2种方法对表达蛋白进行纯化。结果分析表明:该基因编码区全长876 bp,可编码291个氨基酸。PeKDO8PS与拟南芥Arabidopsis thaliana等植物来源的KDSA2的基因有很高序列一致性,而与微生物来源的KDO8PS序列一致性较低。分析毛竹各组织中KDO8PS基因的表达结果表明,该基因在根、茎和叶片中均有表达,但在根中相对表达量较高,此表达模式亦同拟南芥AtKDSA2类似。另外,发现KDO8PS在溶液(30 mmol·L-1Tris-HCl pH 8.0,200 mmol·L-1氯化钠)中以二聚体的形式存在,并且初步筛选出该酶晶体生长条件。此结果为PeKDO8PS蛋白的最终结构分析奠定了基础。
张凤雪徐英武张智俊肖冬长王超莉屈亚平
关键词:林木育种学毛竹组织特异性表达原核表达
毛竹MYB转录因子PeMYB2的克隆与功能分析被引量:12
2013年
MYB类转录因子在调控逆境应答基因的表达起着重要的作用,是最大的植物转录因子之一。文章通过同源基因克隆方法和RACE(Rapid-amplification of cDNA ends)技术,以毛竹幼苗为材料,获得一个MYB类转录因子,命名PeMYB2。氨基酸序列分析表明,PeMYB2具有典型的R2R3-MYB特征,N端含有两个串联重复保守结构域,C端含有一个膜蛋白DUF3651;进化树分析表明,PeMYB2与水稻OsMYB18序列相似性最高,达到85.98%;酵母单杂实验表明,PeMYB2具有转录激活功能。将PeMYB2转化拟南芥对其功能进行分析,获得7株转基因纯合体植株。比较转基因和野生型拟南芥表型发现,PeMYB2的过量表达使转基因拟南芥出现矮化、晚花的现象;非生物胁迫处理(盐胁迫、干旱胁迫、低温胁迫)结果表明,转基因拟南芥中PeMYB2的过量表达,导致转基因植株对盐胁迫和低温胁迫有更高的耐性,但是对低温胁迫的耐受性没有明显的变化;进一步通过盐胁迫信号通路相关Marker基因(NXH1、SOS1、RD29A、COR15A)的定量PCR实验验证,发现PeMYB2对下游这些抗逆基因的表达具有调控作用。上述实验结果表明,毛竹PeMYB2可参与非生物胁迫调控,对毛竹盐胁迫和低温胁迫的响应起着重要的作用。
肖冬长张智俊徐英武杨丽张凤雪王超莉
关键词:毛竹非生物胁迫转基因
共1页<1>
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