熊萍萍
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
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- 发文基金：湖北省教育厅资助项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 多杀性巴氏杆菌C48-16电转化条件的研究被引量：1
- 2007年
- 将C48-16感受态细胞和带有标记基因的质粒DNA混和后进行电转化,通过改变脉冲电压、脉冲次数和质粒DNA浓度等电转化的重要参数,探讨了巴氏杆菌(Pasteurella multocida)C48-16的电转化条件。结果显示:最佳脉冲电压为2.4～2.5kV,最佳脉冲次数为1～2。质粒DNA浓度为58～1.16×102μg/mL转化子最多。所有转化子经标记基因PCR鉴定为阳性克隆子。此方法与常规化学转化法相比操作简单、快速且转化成功率更高。
- 熊萍萍荣俊
- 关键词：电转化脉冲
- 结核分枝杆菌热休克蛋白70启动子的克隆和测序
- 2006年
- 根据结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)热休克蛋白70启动子的基因序列设计1对引物,PCR扩增出150 bp的片段后连接到pMD18-T载体上,用重组质粒载体转化大肠杆菌DH5α,PCR鉴定转化菌后进行序列测定。结果表明,该序列与已报道的3株结核分枝杆菌和1株牛型分枝杆菌的相应序列完全同源。该序列可用于构建大肠杆菌-分枝杆菌穿梭质粒载体,启动外源基因在卡介苗菌中的表达。该基因的克隆可为下一步研究开发人和动物以卡介苗为载体的多价活疫苗打下基础。
- 荣俊姜孝芳匡红艳孙中杰熊萍萍邹国林
- 关键词：热休克蛋白启动子测序卡介苗疫苗
- 多杀性巴氏杆菌外源基因表达元件的构建及其序列分析
- 2015年
- 为了在多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)中高效表达外源基因,克隆了天冬酰氨合成酶A(asn A)基因的启动子Pasn A和终止子Tasn A,双酶切获取p UC18质粒的多克隆位点,将这3个片段组装成一个可以方便插入外源基因的表达元件。测序结果分析表明,Pasn A是巴氏杆菌asn A基因的强启动子,具有原核生物典型的Pribnow盒和SD序列。p UC18的多克隆位点mcs具有多个核酸限制性内切酶的单一切点,便于外源基因的插入。Tasn A是巴氏杆菌asn A基因的强终止子,具有很好的回文结构,在发卡结构后面有一段富含A/T区。3个片段表达元件(Pcms T)的构建为完整的巴氏杆菌-大肠杆菌穿梭表达质粒的构建奠定了基础。
- 李国攀熊萍萍荣俊
- 关键词：终止子
