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王薇
作品数:
1
被引量:3
H指数:1
供职机构:
中国医科大学基础医学院
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发文基金:
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
关一夫
中国医科大学基础医学院
夏蒲
中国医科大学基础医学院
贾宝萍
中国医科大学档案馆
徐小燕
中国医科大学基础医学院
郑华川
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年份
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2010
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胃黏膜特异表达JC病毒T抗原质粒构建及表达鉴定
被引量:3
2010年
目的利用鼠胃黏膜上皮细胞中高活性的角蛋白19(K19)启动子构建K19-JCVT抗原表达质粒并进行鉴定。方法利用PCR方法突变JC病毒T抗原中的NdeⅠ位点,并在两端插入BclⅠ位点,通过BamHⅠ位点将DNA片段与K19启动子连接,构建K19-JCVT抗原质粒。利用酶切和DNA测序确认其DNA序列。免疫组化筛选细胞角蛋白19阳性胃癌细胞,对细胞角蛋白19表达阳性的胃癌细胞系AGS进行K19-JCVT抗原质粒转染,用Western blot方法检测JCVT抗原的表达情况。结果K19-JCVT抗原表达质粒成功构建,AGS胃癌细胞系高表达细胞角蛋白19并用于K19-JCVT抗原表达质粒转染,转染K19-T抗原质粒的AGS细胞系有T抗原表达。结论同义突变和相似连接在质粒构建中起到关键作用,酶切位点的甲基化也是值得注意的问题。
夏蒲
徐小燕
贾宝萍
王薇
关一夫
高野康雄
郑华川
关键词:
JC病毒
T抗原
真核表达
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