石婷婷
- 作品数：2 被引量：4H指数：2
- 供职机构：浙江大学更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 传染性支气管炎病毒非结构蛋白nsp15的体外表达及其单克隆抗体的制备被引量：2
- 2016年
- 以实验室保存的肾型传染性支气管炎病毒(IBV)毒株SC021202作为模板,扩增IBV非结构蛋白nsp15基因后,成功构建了原核表达载体PET-28a(+)-nsp15,将其转化大肠杆菌,经IPTG诱导表达出约45ku的目的蛋白。纯化的nsp15蛋白可与IBV感染鸡血清发生良好反应。用纯化的重组nsp15蛋白免疫小鼠,制备单克隆抗体。经过3轮有限稀释和筛选阳性克隆,最终获得3株稳定分泌nsp15蛋白抗体的细胞株,分别为1A6、2B6和4D7。Western-blot分析显示,3株单克隆抗体都与nsp15蛋白有很好的特异性反应。IFA检测显示,nsp15单克隆抗体与IBV感染的细胞和nsp15基因转染的细胞均出现明显的反应。IBV nsp15单克隆抗体的制备为传染性支气管炎流行病学的监测、鉴别诊断及对其蛋白功能的进一步研究奠定了基础。
- 李乐超石婷婷郎咸勇牟小东王丹丹周继勇廖敏
- 关键词：传染性支气管炎病毒单克隆抗体
- A型流感病毒NS1蛋白单克隆抗体的制备及其亚细胞定位分析被引量：2
- 2016年
- 以A型流感病毒A/Swine/Guangdong/(H3N2,H3病毒)株的基因组作为模板,扩增NS1基因并构建原核表达载体p ET-28a(+)-NS1。以大肠杆菌表达的NS1蛋白为抗原免疫小鼠,制备单克隆抗体,获得了2株分泌单克隆抗体细胞株2H9和3A4。IFA和Western-blot检测显示,抗NS1单克隆抗体与H3病毒感染的细胞有良好的反应性和特异性。亚细胞定位分析显示,H3N2病毒的NS1聚集于核仁处,H1N1病毒NS1聚集于核内周边,PR8毒株的NS1少部分在核内聚集、多数胞质呈颗粒状分布。流感病毒NS1单克隆抗体的制备为流感病毒流行病学监测、鉴别诊断及对其蛋白功能研究提供了工具。
- 杨辉吴小鹏王海龙石婷婷王星博袁庄川颜焰廖敏周继勇
- 关键词：流感病毒NS1单克隆抗体亚细胞定位
