马清华
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：浙江理工大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 真核生物表达成熟体miR-449a及其生物学活性的研究被引量：1
- 2010年
- 通过分子克隆技术将pre-miR-449a及其上下游200 bp序列克隆至pcDNA3.0多克隆位点,采用脂质体转染该载体至人宫颈癌Hela细胞中,Real-Time PCR检测载体的表达能力,同时使用荧光淬灭法检测表达产生的miRNA的生物学活性。结果表明:转染实验组载体的Hela细胞miR-449a的表达明显升高,而对照组表达几乎无变化,显示真核表达载体pcDNA3.0可以高效表达miRNA;此外,目的质粒与报告质粒共转染Hela细胞后绿色荧光明显淬灭而对照组荧光未淬灭,证明表达的miRNA具有生物学活性。
- 武佳杨耿兵李伟娄文加马清华徐艳敏钱程刘立
- 关键词：PCDNA3.0人宫颈癌细胞
- 携带pri-mir-20a的慢病毒表达载体的构建
- 2010年
- 采用PCR扩增获得的pri-mir-20a,过渡质粒pcDNA3.0-H1经BamHⅠ与HindⅢ双酶切后将两者连接产生pcDNA3.0-H1-pri-mir-20a重组质粒,再将PCR获得的H1-pri-mir-20a克隆到慢病毒载体pdc-SEW上获得重组慢病毒载体pdc H1-pri-mir-20a-SEW。将pCMV 8.91、pMD2.VSV.G、pdc H1-pri-mir-20a-SEW三质粒共转染293FT细胞,结果显示48 h后绿色荧光蛋白的表达达到80%,表明已成功构建出携带pri-mir-20a的慢病毒表达载体。该载体的成功构建为深入开展对mi R-20a的生物学功能和靶标验证提供了有效的工具。
- 马清华徐艳敏武佳李伟钱程刘立
- 关键词：慢病毒载体
- 腺病毒介导miR-122联合化疗药物ADM对肝癌细胞杀伤作用的研究被引量：2
- 2010年
- 采用CCK-8比色分析等方法开展腺病毒介导mi R-122联合化疗药物阿霉素(ADM)针对不同人肝癌细胞的杀伤情况的研究。希望通过对比研究,寻找解决化疗药物在临床使用中所出现的疗效低且毒副作用大等难题的方法。研究显示:低浓度的ADM对肝癌细胞的细胞毒作用比较小,但疗效也较差;当ADM浓度增高至80 ng/mL以上,尤其是80 ng/mL的ADM联合20 MOI Ad-mi R122杀伤各种肝肿瘤细胞的能力明显优于单独使用ADM或Ad-mi R122。
- 徐艳敏马清华武佳李伟钱程刘立
- 关键词：ADM肝癌细胞株
