安玉甫
- 作品数：5 被引量：1H指数：1
- 供职机构：华南农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 三黄鸡NHE1基因的克隆和序列分析
- 2013年
- 钠氢离子交换泵1(NHE1)是一种跨膜蛋白,作为已经被证明的J亚群白血病病毒受体在该病的进程中起着关键性的作用。为全面了解NHE1的基因及其编码蛋白的生物学信息,对三黄鸡NHE1基因进行了克隆和序列分析。参考原鸡NHE1基因序列设计引物,采用PCR技术分段克隆三黄鸡NHE1基因序列,并对其进行序列分析。结果表明,克隆得到的三黄鸡NHE1基因全长2 412 bp,含有1个2 412 bp的完整开放式阅读框,编码803个氨基酸。其CDS编码区的核苷酸序列与原鸡、鹌鹑、人、猪、鼠、牛、弓形虫的NHE1基因对应序列的同源性分别为99.8%、92%、78.1%、73.5%、80%、81.8%、40.9%,推导的氨基酸序列同源性分别为99.5%、93.2%、79.3%、79.6%、78.9%、78.7%、26.8%。进化树分析发现,物种内的核苷酸序列的同源性很高,种间同源性较低。生物信息学预测NHE1蛋白结构发现,NHE1蛋白多肽链N端含有12个跨膜结构,有37个磷酸化位点和1个特异性蛋白激酶磷酸化位点。
- 黄志强安玉甫于梦童双刘荣昌王衡宁章勇
- 关键词：NHE1克隆
- RNAi技术在动物病毒性疾病研究中的应用
- 2010年
- 使靶基因表达沉默的RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术,由于其独特的生物学作用,已经作为动物疫病防控领域的新手段在动物病毒性疾病研究中得到了广泛的应用。本文对RNAi技术在猪病、禽病及牛病研究中的应用进行简要综述。
- 安玉甫王衡
- 关键词：RNAI技术双链RNA
- BALB/c小鼠Doppel蛋白的原核表达及其抗血清的制备
- 2011年
- 利用已克隆的BALB/c小鼠Doppel蛋白基因,将其成熟蛋白编码区亚克隆至表达载体pGEX-6P-1上,构建重组表达质粒pGEX-6P-1-PRND。将重组蛋白表达载体转入E.coli BL21(DE3)中诱导表达,SDS-PAGE及Western blot分析结果表明,BALB/c小鼠Doppel蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式高效表达。对表达的蛋白进行提取和纯化并免疫新西兰大白兔制备兔抗血清,初步建立了小鼠睾丸Doppel蛋白组织学分布的免疫组织化学方法。为进一步研究Doppel的结构、功能及其在TSEs发生发展中的作用提供基础材料和数据。
- 程艳芬王衡宁章勇潘俊斌安玉甫吴新涛
- 关键词：BALB/C小鼠原核表达多克隆抗体
- 三黄鸡ST3Gal6基因的半定量RT-PCR及生物信息学分析被引量：1
- 2012年
- 本研究旨在对三黄鸡ST3Gal6基因进行组织表达谱和生物信息学分析。参考三黄鸡ST3Gal6基因序列设计引物,采用PCR技术克隆三黄鸡ST3Gal6基因序列,并利用半定量RT-PCR进行组织表达谱分析;同时对其进行生物信息学分析。结果表明,克隆的三黄鸡ST3Gal6基因全长1169bp,含有1059bp的完整CDS编码区,编码352个氨基酸。其CDS编码区的核苷酸序列与人、黑猩猩、牛、大鼠、蟾ST3Gal6基因对应序列的同源性分别为62%、62%、61.9%、59%、54.4%。组织表达谱分析表明,ST3Gal6基因在各组织均不同程度地表达,其中在大脑表达量很高,肺脏中最低。生物信息学预测ST3Gal6蛋白结构发现,三黄鸡的ST3Gal6蛋白存在2个跨膜螺旋结构域,同时预测ST3Gal6存在22个磷酸化位点和1个特异性蛋白激酶磷酸化位点。
- 周飞崔连成安玉甫宁章勇
- 关键词：半定量生物信息学
- pIRES2-EGFP-prnd真核表达载体的构建及其在BHK细胞中的表达
- 2018年
- 为探讨叠朊蛋白(Doppel)在正常生理条件及相关疾病中的临床及生物学意义,构建BALB/c小鼠Doppel基因prnd的重组真核表达质粒pIRES2-EGFP-prnd,并转染BHK细胞,IFA检测其表达情况。结果表明,Doppel蛋白通过pIRES2-EGFP-prnd在BHK细胞中表达。试验可为进一步研究Doppel蛋白的结构、正常的生理生化功能及其与相关疾病的关系提供重要工具。
- 程艳芬程艳芬宁章勇冯翠萍赵孟孟安玉甫
- 关键词：真核表达载体转染IFA
