张大伟
- 作品数：4 被引量：12H指数：3
- 供职机构：江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 食品级高产亮氨酸氨肽酶重组Bacillus subtilis的构建和发酵优化被引量：4
- 2020年
- 为解决枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)在发酵产亮氨酸氨肽酶(leucine aminopeptidase,LAP)需额外添加抗生素的问题,该研究构建了1株食品级产LAP重组B.subtilis。首先通过Cre/lox系统敲除B.subtilis 168基因组中D-丙氨酸消旋酶基因(dal)得到缺陷型菌株BS168(dal)^-。其次使用高斯组装的方法构建以dal作为标记基因的质粒pMA5-lap-dal(Amp^R,Ori)-并转化至BS168(dal)^-中得到食品级重组菌BS168(dal)-/p MA5-lap-dal(Amp^R,Ori)^-。该工程菌发酵产LAP无需添加抗生素且不含抗性基因。对该菌株进行5 L发酵罐条件优化,在转速300 r/min、温度33℃、p H 7.0、分阶段补料的条件下,酶活最高达到302 U/m L。结果表明,构建的食品级重组B.subtilis产LAP具有潜在的工业应用前景。
- 张大伟刘德华黄钦钦田亚平
- 关键词：枯草芽孢杆菌发酵优化
- 猪心苹果酸脱氢酶酶学性质及稳定性研究被引量：6
- 2007年
- 对动物组织来源的苹果酸脱氢酶——猪心肌苹果酸脱氢酶的酶学性质及稳定性进行了研究.结果表明：苹果酸脱氢酶的相对分子质量约为69 000,含有2个亚基,每个亚基的相对分子质量约为34 000;该酶的最适作用pH为8.0,最适作用温度为50℃;Km值为84.6μmol/L（草酰乙酸,pH8.3）.通过对酶的稳定性研究,该酶在50℃以下具有较好的稳定性,其pH稳定范围为7.0-9.0（25℃,20 h）.
- 龚韧张大伟江龙法孙艳杨海麟王武
- 关键词：苹果酸脱氢酶酶学性质稳定性猪心
- 猪心苹果酸脱氢酶的分离纯化及性质被引量：3
- 2007年
- 采用组织破碎,二度硫酸铵盐析,DEAE Sepharose F.F.离子交换层析及Sephadex G—75 Fine凝胶过滤等纯化方法,从猪心中提取得到了苹果酸脱氢酶。提取纯化的苹果酸脱氢酶经SDS—PAGE测定显示为单一条带,相对分子质量为34000。酶活回收率为57.99%,最适pH为8.0,最适温度为50℃。
- 张大伟杨海麟王武
- 关键词：猪心苹果酸脱氢酶柱层析酶学性质
- 乳酸脱氢酶高产菌株的选育及条件研究
- 2006年
- 以植物乳酸短杆菌RS2-2(Lactobacillus plantarum)为出发菌株,经紫外线、亚硝基胍单独处理和复合处理,获得1株乳酸脱氢酶高产菌株U-N-B14,通过优化实验对该菌株生产乳酸脱氢酶的营养要求和发酵条件进行了研究,优化后的发酵培养基组成为(g/L):酵母膏10,麦芽糖12,乙酸铵4,K2HPO44,NaCl 8,吐温80 2mL/L。发酵条件是:培养温度30℃,pH值6.5,培养时间24 h,接种量8%。在此条件下,1.5 m3罐中试生产的乳酸脱氢酶产量可达1 497 U/g。
- 朱勇王静张大伟杨海麟王武
- 关键词：植物乳杆菌诱变育种发酵条件
