公共文化服务平台

王冰洁: 作品数：13 被引量：40H指数：4; 供职机构：扬州大学兽医学院更多>>; 发文基金：江苏高校优势学科建设工程资助项目江苏省教育厅自然科学基金江苏省高等学校大学生实践创新训练计划项目更多>>; 相关领域：农业科学生物学更多>>

合作作者

ZEA与DON联合染毒对CTLL-2细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Caspase3等表达的影响被引量：3: 2017年; 为了探讨玉米赤霉烯酮(ZEA)与脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)联合作用对免疫系统毒性影响及其毒理机制,试验以T淋巴细胞株(CTLL-2)为材料,在利用CCK-8试验确定ZEA、DON对CTLL-2细胞联合染毒浓度的基础上,研究了ZEA与DON联合染毒对CTLL-2细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3等表达的影响,试验设对照组、ZEA染毒组(5μg/m L ZEA)、DON染毒组(0.5μg/m L DON)、ZEA+DON联合染毒组(5μg/m L ZEA+0.5μg/m L DON),染毒时间为48 h,用流式细胞术检测细胞的凋亡率,Western-blot检测Bax、Bcl-2和Caspase级联反应相关蛋白的表达情况。结果表明:与对照组相比,各染毒组CTLL-2细胞的凋亡率均极显著升高(P<0.01);各染毒组细胞凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2比值和Cleaved Cspase-3、Cleaved Caspase-8、Cleaved Caspase-9等蛋白的表达量均较对照组显著升高(P<0.05或P<0.01);联合染毒组呈现协同效应。说明ZEA与DON联合染毒在诱导免疫细胞凋亡方面发挥协同效应,它们共同存在可以发挥更强的免疫抑制效应;ZEA与DON联合染毒诱导CTLL-2细胞发生凋亡的机制与Bax/Bcl-2上调的线粒体通路密切相关。; 王冰洁潘顺叶李茜岑雪邹辉顾建红袁燕刘学忠刘宗平卞建春; 关键词：联合染毒 CCK-8 凋亡

脱氧雪腐镰刀菌烯醇诱导CTLL-2细胞凋亡的信号途径研究被引量：3: 2016年; 为探讨脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)对动物免疫功能的影响及其机理,以细胞毒性T淋巴细胞株CTLL-2为材料,用不同浓度的DON(0、0.5、1、2μg/m L)处理CTLL-2细胞48h,流式细胞术检测细胞的凋亡率,免疫印记法检测细胞凋亡相关通路蛋白CleavedCaspase 9、Cleaved-Caspase 3、Fas L、Fas、Cleaved-Caspase8等表达情况;并用流式细胞术检测了DON(1μg/m L)与Fas L中和抗体(10μg/m L)共处理后细胞的凋亡率。结果表明,随着DON浓度的升高,CTLL-2细胞的凋亡率呈上升趋势,染毒组均较对照组有极显著差异(P<0.01);Bax/Bcl-2的比值升高,呈剂量-效应关系;DON促进细胞色素c(Cyt-c)从线粒体中释放到胞浆中,能够上调Cleaved-Caspase 9、Cleaved-Caspase 3的表达,染毒组均较对照组有显著性或极显著差异(P<0.05或P<0.01);Fas L、Fas、Cleaved-Caspase 8蛋白表达量随着DON浓度的升高逐渐增加,染毒组均较对照组有显著性或极显著差异(P<0.05或P<0.01);随着DON浓度的升高,p38 MAPK、JNK、Erk的磷酸化水平也升高,呈剂量-效应关系;与DON处理组相比,Fas L中和抗体与DON共同处理组细胞凋亡率明显下降(P<0.01)。结果表明,DON可以诱导CTLL-2细胞发生凋亡,激活CTLL-2细胞线粒体通路、MAPKs通路,DON通过死亡受体途径诱导CTLL-2细胞凋亡,影响动物的免疫机能。; 李茜岑雪潘顺叶王冰洁王凤丽邹辉袁燕顾建红刘学忠刘宗平卞建春; 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇免疫功能凋亡通路

伏马毒素B_1单克隆抗体的研制及ELISA检测方法的建立被引量：1: 2016年; 为了制备伏马毒素B1（FB1）单克隆抗体,建立针对FB1快速、简便、灵敏的检测方法,试验用戊二醛一步法分别偶联FB1与BSA和OVA作为免疫原和检测原,5次免疫后取脾细胞与SP2/0融合。结果表明：共筛选出2株能稳定分泌抗FB1单克隆抗体杂交瘤细胞,选取其中1株5F5杂交瘤细胞制备小鼠腹水,所制腹水效价达到1∶256000,其半数抑制浓度（IC50）为6.1ng/mL,检测下限（LOD）低于0.05ng/mL。回收率在84.20%-102.60%之间,变异系数为2.48%-8.79%。制备的单克隆抗体对FB1抑制率为100%,与呕吐毒素（DON）、玉米赤霉烯酮（ZEN）、黄曲霉毒素B1（AFB1）、α-玉米赤霉烯醇（α-ZOL）等基本无交叉反应。; 范文桐项自来徐辉王光光王冰洁蔡国栋王凤丽顾建红袁燕刘学忠刘宗平卞建春; 关键词：单克隆抗体杂交瘤间接竞争ELISA

ERK信号在玉米赤霉烯酮诱导的睾丸支持细胞自噬中作用的研究被引量：3: 2017年; 为探讨玉米赤霉烯酮(ZEA)雄性生殖毒性作用机理,本试验以睾丸支持细胞TM4细胞系为对象,研究了ZEA对睾丸支持细胞自噬及相关信号通路的影响。试验分别以浓度为0、0.1、1、10、20、30 mol/L的ZEA进行染毒,24 h后,利用CCK-8、激光共聚焦,透射电镜、Western-blot等技术检测了ZEA对TM4细胞的存活率、自噬,MAPK信号通路的影响以及MAPK信号通路与自噬的相互关系。免疫荧光结果显示,随着ZEA浓度的升高,TM4细胞内LC3聚点数量显著升高,酸性囊泡的个数增多;Western-blot结果显示,自噬相关蛋白LC3Ⅱ、Beclin-1、ATG5、ATG7表达显著升高,而P62蛋白表达显著下降(P<0.05或P<0.01);MAPK信号通路中ERK1/2磷酸化水平显著升高(P<0.05或P<0.01),加入ERK磷酸化抑制剂U0126后,ZEA诱导TM4自噬水平显著下降(P<0.05或P<0.01)。结果表明,在一定浓度范围内,玉米赤霉烯酮可以诱导TM4细胞产生自噬,且发生自噬与ERK信号通路激活有关。; 王冰洁冯楠楠郑王龙薛画眉达剑森邹辉顾建红袁燕刘学忠刘宗平卞建春; 关键词：玉米赤霉烯酮睾丸支持细胞自噬 ERK

一例犬桡尺骨骨折的诊断与治疗被引量：5: 2018年; 扬州大学动物医院接诊一例桡尺骨骨折经外固定后预后不良的患犬病例,该犬表现右前肢右前肢外翻,无法正常着地。经X线检查确诊,犬的桡尺骨骨折端发生错位对合。对该患犬实施了接骨板内固定,效果良好。; 冯楠楠孙凯孙凯王冰洁刘学忠; 关键词：X线检查手术治疗

α-玉米赤霉烯醇单克隆抗体的研制及CiELISA检测方法的建立: 2017年; 为了建立快速、简便、灵敏的检测动物性食品中α-玉米赤霉烯醇(α-Zearalenol,α-ZOL)残留的方法,试验利用活性酯法将α-ZOL与牛血清白蛋白(BSA)、卵清白蛋白(OVA)偶联鉴定后常规免疫6~8周龄的雌性BALB/c小鼠。经筛选,获得1株稳定分泌抗α-ZOL单克隆抗体的杂交瘤细胞(1D4),利用1D4获得的抗α-ZOL单克隆抗体建立了检测α-ZOL的间接竞争酶联免疫吸附试验(Ci ELISA)方法。结果表明:该检测方法在1~1 000 ng/m L范围内线性良好,标准曲线方程为y=0.280 2x+0.025 6(R2=0.990 1),半数抑制浓度为76.32 ng/m L。牛奶加标回收试验显示,α-ZOL的回收率在81.29%~117.53%之间,变异系数在4.42%~9.33%之间。试验建立的Ci ELISA检测方法可用于牛奶中α-ZOL残留的定量检测。; 王光光王冰洁卞晓娇范文桐项自来蔡国栋王凤丽顾建红袁燕刘学忠刘宗平卞建春; 关键词：单克隆抗体

自噬在ZEA对睾丸支持细胞细胞周期影响中的作用被引量：8: 2017年; 为探讨玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEA)雄性生殖毒性的机理,本试验展开了ZEA对睾丸支持细胞细胞周期的影响以及自噬在ZEA对睾丸支持细胞细胞周期影响中的作用研究。试验以原代睾丸支持细胞为材料,分别以浓度为0(对照组),0.1,1,10,20,30μmol/L ZEA进行染毒,24h后利用CCK-8法、流式细胞术、免疫荧光技术和Western blot等进行ZEA对睾丸支持细胞的活率、细胞周期分布、LC3聚点、自噬及细胞周期相关蛋白等影响的检测。流式细胞术检测结果显示:与对照组比较,当ZEA浓度高于10μmol/L时,G0/G1期比例显著下降(P<0.05),G2/M期的比例极显著升高(P<0.01);与20μmol/L ZEA组相比,自噬抑制剂(CQ)+20μmol/L ZEA组细胞周期的G2/M期的比例显著降低(P<0.05),自噬促进剂(RAP)+20μmol/L ZEA组细胞周期的G2/M期的比例显著升高(P<0.05)。免疫荧光检测结果显示,当ZEA浓度高于10μmol/L时,产生LC3荧光信号的细胞数目较对照组呈极显著性升高(P<0.01)。Western blot检测结果显示:与对照组比较,当ZEA浓度高于10μmol/L时,LC3蛋白的表达量呈极显著性升高(P<0.01),CDK4、CyclinD1等细胞周期蛋白的表达显著降低(P<0.05);与20μmol/L ZEA组相比,CQ+20μmol/L ZEA组CyclinD1、CDK4等蛋白的表达量上升(P<0.05),RAP+20μmol/LZEA组CyclinD1、CDK4等的表达量下降(P<0.05)。结果表明:ZEA能诱导睾丸支持细胞发生自噬,并使睾丸支持细胞发生G2/M期阻滞,且存在剂量依赖性;促进自噬可导致细胞周期阻滞在G2/M期,造成M期延长,而自噬的缺陷可以部分逆转ZEA诱导睾丸支持细胞周期G2/M期的阻滞。在一定浓度范围内,ZEA能显著抑制睾丸支持细胞的增殖,细胞自噬在这一过程中起促进作用。; 王冰洁郑王龙司梦雪刘青邹辉顾建红袁燕刘学忠刘宗平卞建春; 关键词：玉米赤霉烯酮睾丸支持细胞细胞周期 G2/M期阻滞自噬

慢性饮水染镉对大鼠血液及睾丸中某些酶活性的影响: 2017年; 为了探讨慢性饮水染镉(Cd)对大鼠血液、睾丸中某些酶活性的影响,试验将30只近交系SD大鼠(雄性,170 g左右)随机分成5组,即对照组、试验1组、试验2组、试验3组、试验4组,分别饮用Cd(Cd Cl2)质量浓度为0,25,50,100,200 mg/L的饮水。56 d后宰杀大鼠,测定血液中和睾丸中镉的蓄积量及碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶同工酶-X(LDH-X)、酸性磷酸酶(ACP)、乳酸脱氢酶(LDH)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)、山梨醇脱氢酶(SDH)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、γ-L-谷氨酰转肽酶(GGT)活性。结果表明:与对照组相比,试验1组大鼠血浆LDH活性降低;血浆AST和ALT活性的剂量效应不规律,试验2组有降低现象,而且均只有试验4组显著升高(P<0.05)。与对照组相比,试验2组睾丸中ALP活性显著降低(P<0.05);试验3组中,除LDH-X和ACP外,其他酶活性均显著降低(P<0.05);试验4组各酶活性均显著降低(P<0.05)。慢性饮水染镉,睾丸中某些酶活性的改变较血液中敏感,睾丸中LDH和ALP可以作为反映慢性饮水染镉雄性生殖毒性较敏感的生化指标。; 王光光蔡国栋王冰洁范文桐项自来王凤丽顾建红袁燕刘学忠刘宗平卞建春; 关键词：镉(CD)睾丸饮水

ERK信号通路对玉米赤霉烯酮诱导大鼠睾丸支持细胞G2期阻滞的影响被引量：2: 2018年; 为揭示玉米赤霉烯酮（zearalenone,ZEA）雄性生殖毒性的机理,以雄性Wistar大鼠原代睾丸支持细胞（SC）为材料,对ERK信号通路在ZEA对睾丸支持细胞G2期阻滞中的作用进行了研究。采用20 mol/L的ZEA对SC进行染毒,分别采用U0126（ERK抑制剂）共处理、ERK siRNA沉默ERK基因的方法,利用流式细胞术、免疫荧光技术和Western-blot等技术对SC细胞周期的变化及细胞周期相关蛋白进行检测。结果显示,与ZEA组相比,U0126＋ZEA共处理组G2/M期细胞比例极显著降低（P〈0.01）,p53、p21蛋白的表达量极显著下降（P〈0.01）,关键激酶cdc2的活性极显著增强（P〈0.01）,cdc25B的蛋白表达量显著增加（P〈0.05）,CyclinB1表达有所上升但差异不显著（P〉0.05）,表达p-H3的细胞数显著增多。与ZEA染毒组相比,ERK1/2 siRNA＋ZEA组G2/M期细胞比例均极显著降低（P〈0.01）;ERK1/2 siRNA＋ZEA组的cdc2活性均增加（P〈0.05或P〈0.01）,cdc25B的蛋白表达量均升高（P〈0.05或P〈0.01）,CyclinB1的蛋白表达量均极显著升高（P〈0.01）。上述结果表明,ERK信号通路通过调控G2期相关蛋白参与了ZEA诱导的睾丸支持细胞G2期阻滞。; 包若昱王冰洁冯楠楠邹辉袁燕顾建红刘学忠刘宗平卞建春; 关键词：玉米赤霉烯酮睾丸支持细胞 G2/M期阻滞 ERK信号通路

玉米赤霉烯酮致大鼠睾丸支持细胞DNA损伤的研究被引量：1: 2018年; 以大鼠原代睾丸支持细胞为材料，用0（对照组）、5、10、20μmol／L的玉米赤霉烯酮（ZEA）进行染毒。24h后，通过彗星试验观、免疫荧光试验、Western—blot等方法检测ZEA对细胞DNA及相关蛋白表达的影响。结果显示，随着ZEA浓度的增加，DNA彗星样拖尾现象逐渐明显，与对照组比较，10μmol／L和20μmol／LZEA剂量组的细胞的彗星拖尾尾长、尾部DNA含量比例和尾矩均有极显著差异（P〈0．01）；10μmol／L和20μmol／LZEA剂量组γ—H2AX焦点数量均较对照组有极显著差异（P〈0．01）；各染毒组γ-H2AX、P53、P21等蛋白的表达水平均较对照组有显著或极显著差异（P〈0．05或P〈0．01）。结果表明。ZEA能致大鼠睾丸支持细胞DNA损伤。这一过程能激活P—ATM—P53-P21信号通路，促使细胞发生生长阻滞并抑制其增殖。; 张大委高雪梅蔡沛蓉王冰洁冯楠楠王玲李茜邹辉顾建红袁燕刘学忠刘宗平卞建春; 关键词：玉米赤霉烯酮睾丸支持细胞 DNA损伤彗星试验

王冰洁

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

王冰洁

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈