王文礼
- 作品数：1 被引量：7H指数：1
- 供职机构：河南师范大学更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- His标签单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用被引量：7
- 2008年
- 目的:制备和鉴定抗His标签单克隆抗体(mAb),初步建立检测和纯化带His标签融合蛋白的方法。方法:用碳化二亚胺法合成His-tag完全抗原,免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术进行细胞融合,通过有限稀释法和间接ELISA法克隆和筛选阳性杂交瘤细胞株。常规制备腹水,用辛酸-硫酸铵法纯化,并对纯化的mAb进行特异性鉴定。结果:His-tag完全抗原偶联成功,经细胞融合、筛选及克隆化,成功获得1株分泌His标签mAb的杂交瘤细胞株。制备腹水测得腹水效价高于1∶106,且此株mAb与其他融合蛋白标签无交叉反应,并在含His标签融合蛋白的鉴定实验中取得了满意效果。结论:成功制备了1株His标签mAb,为带His标签融合蛋白的研究应用提供了重要的工具。
- 王文礼王云龙李晨阳陈小科刘利锋
- 关键词：单克隆抗体蛋白印迹
