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白杨

作品数：4 被引量：32H指数：3
供职机构：华南农业大学动物科学学院更多>>
发文基金：广东省科技攻关计划更多>>
相关领域：农业科学更多>>

合作作者

文献类型

  • 4篇中文期刊文章

领域

  • 4篇农业科学

主题

  • 4篇病毒
  • 2篇纯化
  • 1篇单克隆
  • 1篇单克隆抗体
  • 1篇原核表达
  • 1篇圆环病毒
  • 1篇猪圆环病毒
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞培养
  • 1篇抗体
  • 1篇克隆
  • 1篇靶标
  • 1篇PK-15细...
  • 1篇VALLEY
  • 1篇VIRUS
  • 1篇VP1
  • 1篇VP1蛋白
  • 1篇CAP
  • 1篇CAP蛋白
  • 1篇IFN-Β

机构

  • 4篇华南农业大学

作者

  • 4篇马静云
  • 4篇白杨
  • 3篇陈桂华
  • 2篇孙媛
  • 2篇周玲
  • 1篇赵晓亚

传媒

  • 2篇中国兽医科学
  • 1篇华南农业大学...
  • 1篇中国预防兽医...

年份

  • 1篇2023
  • 1篇2019
  • 1篇2017
  • 1篇2016
共 4 条 记 录，以下是 1-4
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排序方式：
国内首株猪塞内加谷病毒(Seneca Valley virus)的分离鉴定被引量：22
2016年
猪塞内加谷病毒(Seneca Valley virus,SVV)是一种新出现的可感染仔猪及母猪并导致仔猪死亡的病毒。2015年3月份至今年在我国、巴西及美国出现了几起塞内加谷病毒感染猪群并伴随严重的临床症状及发病死亡的疫情,造成严重的经济损失。为分离鉴定SVV,本研究将RT-PCR检测为SVV阳性的猪临床样品无菌处理后接种PK-15细胞,连续传代培养。通过细胞病变、RT-PCR扩增、电镜观察和基因序列测定对细胞培养物进行鉴定。结果表明我们成功分离到国内首株SVV,并将其命名为SVV CH-01-2015。全基因组的系统发育分析表明SVV CH-01-2015位于Senecavirus病毒属,与Senecavirus病毒属中的病毒成员同源性最高,由此可以确定本研究所分离到的SVV属于Senecavirus病毒属。本研究为进一步研究SVV的致病性和致病机制奠定了基础。
赵晓亚伍绮文伍子娴陈桂华白杨马静云
关键词：细胞培养
猪圆环病毒3型Cap蛋白的表达纯化及单克隆抗体的制备被引量：8
2019年
猪圆环病毒3型(porcine circovirus 3,PCV3)是新近被发现的病原,与之相关的疾病包括母猪繁殖障碍、猪皮炎与肾病综合征、猪呼吸道疾病综合征、仔猪先天性震颤等。本研究采用PCR方法从PCV3/CN/GDLC1/2016株中扩增出衣壳蛋白(Cap)基因,对Cap基因进行序列分析并预测其二级结构,将去除信号肽序列的PCV3 Cap基因片段克隆到表达载体pET-32a(+)中,测序验证后转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行原核表达,经镍柱纯化表达蛋白,通过免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体(MAb)。结果表明,重组PCV3 Cap蛋白为包涵体,大小约38 ku,最佳诱导时间为4 h。通过镍柱成功纯化PCV3 Cap蛋白,筛选获得A8F、C6D、C7E、C6E、C9C、C9E、B7D和C11C等8株能稳定分泌抗PCV3 Cap蛋白抗体的杂交瘤细胞株。ELISA结果表明,A8F、C6D、C9E和B7D MAb均属于IgG2b亚类,C7E、C6E和C9C均属于IgM亚类,C11C属于IgG1亚类;A8F、B7D和C11C MAb效价均大于1∶64 000,C9E效价为1∶32 000,C6E效价为1∶8 000,C6D、C7E和C9C效价均为1∶1 000。经Western-blot分析,重组PCV3 Cap蛋白能与抗His标签抗体和抗PCV3 Cap蛋白MAb进行特异性免疫印迹反应,证实表达蛋白具有良好的反应原性。本研究为今后PCV3的防控提供了技术支持和实验基础,具有重要的生产实践意义。
陈桂华孙媛周玲李迪白杨麦凯杰高金铭马静云
关键词：CAP蛋白原核表达纯化单克隆抗体
塞内加谷病毒VP1蛋白的表达纯化及鉴定被引量：3
2017年
为表达并纯化塞内加谷病毒(Senecavirus A,SVA)的VP1蛋白,克隆SVA的VP1基因,测定其序列并构建遗传进化树,分析VP1蛋白氨基酸突变位点并预测其二级结构。然后将VP1基因克隆至载体pET-32a(+)中,IPTG诱导表达VP1重组蛋白,用Ni-NTA亲和层析柱纯化并用W estern-blot进行验证。结果显示,表达的VP1重组蛋白的大小为48 ku,主要以包涵体形式存在,能与抗His标签的单克隆抗体发生特异性免疫反应。结果表明成功表达并纯化出VP1重组蛋白。
白杨伍绮文陈桂华周玲李怡昀周雯馨马若瑶马静云
关键词：VP1蛋白纯化
MicroRNA-1285及其靶标DDX3X对猪塞内卡病毒感染PK-15细胞的调控作用
2023年
[目的]探究MicroRNA-1285(miR-1285)及其靶标DDX3X在猪塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)感染PK-15细胞中的调控作用。[方法]利用qRT-PCR、双荧光素酶活性及Western blot等方法研究miR-1285和DDX3X对I型干扰素(IFN-β)分泌及RIG-I信号通路的作用,分析miR-1285及DDX3X对SVA 3C蛋白基因表达的影响。[结果]SVA感染PK-15细胞后,miR-1285表达量显著升高,并且miR-1285与DDX3X存在负靶向关系,二者可促进IFN-β转录及蛋白水平的表达。miR-1285通过靶向DDX3X对RIG-I信号通中的MAVS、TRAF3信号分子起调控作用。对于SVA 3C蛋白基因,DDX3X可以显著抑制其转录,并且可以逆转miR-1285所诱导的上调趋势。[结论]SVA感染PK-15细胞后,宿主miR-1285及其靶标DDX3X对IFN-β及病毒3C蛋白的表达具有调控作用,研究结果将为明确miRNAs调控SVA感染的分子机制奠定基础,并为SVA的防控和诊断提供新的科学依据。
孙媛唐晓钰白杨陈雨琪郑瑶瑶吴佼玲蓝天马静云
关键词：IFN-Β
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