郭志
- 作品数:2 被引量:6H指数:2
- 供职机构:扬州大学兽医学院更多>>
- 发文基金:江苏省高校优势学科建设工程资助项目长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生更多>>
- 苏中某地区猪戊型肝炎病毒检测及基因序列分析被引量:4
- 2013年
- 应用反转录-巢式聚合酶链法(RT-nPCR)对苏中某猪场猪粪便标本和生猪屠宰中心猪胆汁标本进行HEVRNA的检测,并对部分阳性标本进行克隆测序及阳性分析,以探讨猪戊型肝炎在该地区的流行特点。结果表明:采集的90份胆汁标本中,有4份HEV检测呈阳性,阳性率为4.44%。在140份猪粪便标本中,只有3~4月龄的35份标本中检出3份HEV RNA阳性,阳性率为8.57%。其余月龄粪便标本中均未检出HEV RNA阳性。序列分析发现猪HEV相互之间在ORF2部分区域的核苷酸序列的同源性为88.0%~100.0%。与基因Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ型的同源性为78.0%~86.0%,81.3%~82.7%,78.7%~84.0%,86.0%~98.7%。证明该地区存在猪戊肝病毒,且该猪源HEV属于基因Ⅳ型。
- 郭志吴超朱嘉磊徐建生
- 关键词:戊型肝炎病毒基因型基因序列分析
- 猪戊型肝炎病毒ORF2基因不同抗原区域的原核表达及鉴定被引量:2
- 2014年
- 为了表达出含有猪戊型肝炎病毒(hepatitis Evirus,HEv)天然免疫表位的重组蛋白作为血清学诊断的候选抗原,利用Protean软件对猪戊型肝炎病毒ORF2区域基因进行分析,选取2段抗原富集区域(290~405aa和398~619aa)用RT—PCR技术扩增该区域基因。然后把扩增的目的基因导入pGEX-6P-1表达载体中并在大肠杆菌BL21中诱导表达。结果显示,成功表达了大小为39ku和48ku的融合蛋白;重组蛋白经变复性透析纯化后进行的Western—blot分析表明,48ku融合蛋白可与HEV阳性血清反应,表明该蛋白具有良好的反应原性。结果表明,猪HEV的天然免疫表位处于398~619aa之间。研究结果为HEV结构蛋白抗原表位的筛选及猪戊型肝炎血清学诊断的研究奠定了基础。
- 郭志陈飞刘水芳吴萌徐建生
- 关键词:猪戊型肝炎病毒ORF2基因原核表达融合蛋白