顾盼 作品数:8 被引量:8 H指数:2 供职机构: 重庆理工大学药学与生物工程学院 更多>> 发文基金: 重庆高校优秀成果转化资助项目 重庆市科技攻关计划 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 更多>>
HPV16E6、HPV18E7原癌蛋白免疫组化试剂盒的建立 宫颈癌是由人乳头瘤病毒(Human papllomavirus,HPV)引起的一种常见的高发于女性的恶性肿瘤,其死亡率高居女性肿瘤第二位。近年来统计发现,我国农村地区宫颈癌筛查范围覆盖低,农村地区发病率和致死率均高于城市... 顾盼关键词:宫颈癌 肿瘤标志物 文献传递 新城疫病毒分子生物学特性及检测方法的研究进展 被引量:2 2017年 新城疫(ND)是一种鸡和火鸡急性、烈性、高度接触性疾病,由新城疫病毒(NDV)引起,死亡率可达100%,给养禽业带来了严重经济危害,被世界动物卫生组织(OIE)列为必须通报的动物疫病。在我国,新城疫的传播虽然已得到了控制,但NDV隐性感染基因对人类公共卫生依旧存在一定影响。由此,加深NDV各蛋白的结构及功能的研究、对现有的NDV检测技术进行改进以及新的检测技术平台的开发对ND的防御具有重要意义。主要对NDV各蛋白的结构、功能及检测技术的进展进行了阐述,为临床和科研工作者提供一定的参考。 王玲玲 顾盼 唐晓莲 周康森 蒋鹏俊 吴胜昔关键词:新城疫病毒 结构蛋白 抗HPV16E6全蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:1 2017年 为了制备特异性识别HPV16E6蛋白的单克隆抗体,为建立HPV早期诊断试剂盒提供有效试剂,通过细胞融合、间接ELISA方法筛选阳性克隆、多次亚克隆得到稳定分泌抗体的单克隆杂交瘤细胞株,体内诱生法大量制备腹水,过UNOsphere SuPrA^(TM)柱和ENrich^(TM)SEC650分子筛柱纯化,通过蛋白电泳鉴定其纯度并测定抗体浓度,并采用Western Blot法和间接免疫荧光法验证纯化后HPV16E6抗体与HPV16型阳性Caski细胞和HPV18型阳性Hela细胞特异性结合。建立了亚型为IgG2a的单克隆HPV16E6-4D4杂交瘤细胞株,两步纯化后得到纯度较高的抗体,可特异性识别HPV16型阳性的Caski细胞中的E6蛋白,不与Hela细胞反应,为在蛋白水平上检测HPV16型病毒提供了新手段。 顾盼 胡仁建 王玲玲 周康森 吴胜昔 蔡家利关键词:单克隆抗体 蛋白免疫印迹 间接免疫荧光法 猪繁殖与呼吸综合征病毒样颗粒的构建 被引量:5 2015年 为构建高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)病毒样颗粒(VLPs)疫苗,以分离鉴定的HP-PRRSV CQ株的GP5和M蛋白的全部编码基因为模板,利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统,共表达GP5蛋白和M蛋白,并采用SDS-PAGE、Western-blot对重组蛋白进行定性分析;通过透射电子显微镜对病毒样颗粒进行直观的形态学鉴定。结果表明,利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统能够成功地共表达重组质粒pFastBac1-GP5-M的GP5蛋白和M蛋白,并能自动装配成病毒样颗粒,显示具有与天然蛋白类似的免疫原性;电镜观察到病毒样颗粒的形态与文献中描述一致,直径约为50nm。本试验结果为猪繁殖与呼吸综合征病毒样颗粒疫苗的研究奠定了基础。 王璐 肖红 顾盼 王玲玲 周康森 陈脊宇 黄倩 黎晓敏 蔡家利关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5蛋白 M蛋白 病毒样颗粒 一种新城疫病毒双抗体夹心AlphaLISA检测试剂盒及其检测方法 本发明提供一种新城疫病毒双抗体夹心AlphaLISA检测试剂盒及其检测方法;所述检测试剂盒包括包被有新城疫病毒抗体的受体微球、生物素标记的新城疫病毒抗体和包被有链霉亲和素的供体微球;所述检测方法在微孔板中依次加入标准品或... 吴胜昔 王玲玲 蔡家利 罗彬彬 龙京慧 李袁元 张中豪 周康森 顾盼文献传递 猪繁殖与呼吸综合征病毒样颗粒疫苗的研究概况 2016年 猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)接触传染导致的,可引起母猪流产及仔猪呼吸系统障碍,使养猪业蒙受了巨大的经济损失。而目前,预防PRRS的主要措施是疫苗免疫,在实际养殖中以灭活疫苗和弱毒疫苗为主,但由于传统疫苗存在免疫效果差和返毒等潜在缺点,使得人们更迫切地需要可替代的更具优势的新型疫苗的出现。 王璐 肖红 周康森 王玲玲 顾盼 黄倩 蔡家利 黎晓敏关键词:疫苗免疫 病毒样颗粒 接触传染 母猪流产 PRRS 重庆两株H5N1流感病毒的HA、NA基因克隆及序列分析 2017年 2012年,从重庆北碚区和巴南区的家禽养殖场死鸭和病鸡体内分离出两株H5N1禽流感病毒,分别命名为A/duck/Chongqing/BB/H5N1和A/chicken/Chongqing/BN/H5N1,并对这两株H5N1禽流感病毒的HA、NA和M蛋白的基因进行了克隆及序列分析,在基因和蛋白质水平上分析其同源性。遗传进化树分析结果表明:这两毒株的HA、NA和M基因不处于同一支上,亲缘关系较远;这两毒株的HA、NA、M蛋白的基因同源性分别达95%,95%,97%;两毒株的HA蛋白裂解位点氨基酸序列均为RERRR-KR,符合高致病性禽流感的特征。本次分离的流感病毒的基因克隆鉴定和序列分析为禽流感的流行病学研究、疫苗研制以及防控提供重要理论依据。 胡仁建 顾盼 蔡家利 刘海军 丁森 张奎 李重阳 陈华 王冬梅关键词:H5N1 进化分析 禽流感H9N2病毒样颗粒疫苗佐剂的筛选及其对鸡的免疫效果评价 2017年 为使禽流感H9N2病毒样颗粒疫苗尽早投入市场,有效防控H9N2禽流感的流行,拟从油乳、ISA 206和微球佐剂中筛选出一种最适用于禽流感H9N2病毒样颗粒疫苗的佐剂。首先对H9N2病毒样颗粒血凝效价及血凝素(HA)含量的测定,然后制备出禽流感H9N2病毒样颗粒油乳疫苗、ISA 206佐剂疫苗、微球疫苗,并对其稳定性、无菌性和安全性等进行检验。通过溶菌酶含量、血凝抑制试验以及T淋巴细胞刺激指数等试验检测其非特异性免疫和特异性免疫水平。结果表明:微球VLP疫苗组溶菌酶含量高于其他各疫苗组(p﹤0.01),能引起非特异性免疫;微球VLPs(口服)疫苗组的血凝抑制滴度高于其他各疫苗组(p﹤0.01),抗体增长趋势与阳性对照组无显著差异(p>0.05),产生了有效的体液免疫应答;微球VLP疫苗(口服)疫苗组T淋巴细胞刺激指数最高。微球口服疫苗其免疫原性强,安全稳定,能诱导机体产生有效的免疫应答,可为新型病毒样颗粒疫苗佐剂的选择提供参考。 周康森 顾盼 王玲玲 吴胜昔 蔡家利关键词:病毒样颗粒 佐剂 微球