李改良
- 作品数:1 被引量:1H指数:1
- 供职机构:第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金:陕西省科学技术研究发展计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- COPS3基因cDNA的克隆及表达被引量:1
- 2007年
- 目的:克隆COPS3基因cDNA,构建其原核融合蛋白表达载体并表达和鉴定。方法:从培养的人骨肉瘤细胞系SOSP-9607细胞中提取总RNA,经RT-PCR获得COPS3基因。将该基因克隆到pGEM-T-Easy载体中,酶切及测序鉴定。将COPS3基因插入pET28 a融合蛋白表达载体中,IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE分析。免疫印迹法鉴定COPS3蛋白的表达。结果:cDNA测序证明,获得了COPS3基因cDNA,其序列与Genebank中报道序列完全一致。酶切分析表明,成功构建了含COPS3基因的pET28 a融合蛋白表达载体。SDS-PAGE以及免疫印迹法鉴定分析表明,COPS3蛋白获得高效表达,分子质量为51Ku,表达量约占菌体总蛋白的30%。结论:成功克隆和表达了COPS3 cDNA。
- 苏海川陈军赵玉红李改良李陕区
- 关键词:CDNA克隆骨肉瘤