欧阳丹
- 作品数：6 被引量：12H指数：3
- 供职机构：华南农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- miR-92a-3p对3T3-L1前体脂肪细胞增殖与分化的影响被引量：4
- 2016年
- 为探讨mi R-92a-3p对3T3-L1前体脂肪细胞增殖与分化的影响,运用脂质体转染化学修饰模拟物mi R-92a-3p mimic使mi R-92a-3p过表达,并采用实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹检测、油红染色、甘油三酯检测、CCK-8检测和细胞周期检测等方法,研究mi R-92a-3p对3T3-L1前体脂肪细胞增殖和分化为成熟脂肪细胞的影响。结果显示,mi R-92a-3p在3T3-L1前体脂肪细胞成脂分化过程中显著上调,过表达mi R-92a-3p能促进脂肪细胞分化指标基因(PPARγ、C/E B Pα、F ABP4)的m RNA和蛋白表达,增加甘油三酯的聚积,且能下调细胞周期G 1期标志基因(Cyclin D 1、D3和CDK4)的m RNA和蛋白表达。结果表明,mi R-92a-3p抑制3T3-L1前体脂肪细胞增殖并且促进其分化为成熟脂肪细胞。
- 张丽华欧阳丹徐立凤马勇江张媛李玉谷
- 关键词：增殖成脂分化
- miR-92a-3p对3T3-L1前脂肪细胞增殖与分化的影响
- 本试验运用脂质体转染miR-92a-3p mimic使miR-92a-3p过表达,使用miR-92a-3p inhibitor抑制miR-92a-3p表达,并采用实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹、油红染色、甘油三酯检测、...
- 张丽华欧阳丹徐立凤马勇江张媛李玉谷
- 关键词：3T3-L1前脂肪细胞细胞增殖成脂分化
- 文献传递
- 鸡脂肪源间充质干细胞的分离与鉴定被引量：3
- 2014年
- 【目的】建立鸡脂肪源间充质干细胞的分离与鉴定方法.【方法】用I型胶原酶消化法分离天露黄鸡脂肪间充质干细胞(AMSCs),CCK-8检测细胞生长活力,RT-PCR鉴定其特异性标记物,化学法对其进行成脂和成骨分化诱导.【结果和结论】原代及传代的细胞呈成纤维细胞样形态,并能传代至10代,其活力无明显变化;细胞生长曲线呈S型;RT-PCR检测显示AMSCs的特异性标志物CD71、CD44和CD29表达呈阳性,而属于造血干细胞的特异性标志物CD34和CD45呈阴性;AMSCs通过不同诱导液被成功诱导分化为成骨细胞和脂肪细胞,在成脂分化过程中有脂滴形成,油红O染色呈阳性,过氧化物酶体增殖物激活受体基因γ(PPARγ)和脂肪酸基因(FAS)的mRNA表达量升高;在成骨分化过程中有钙结节形成,茜素红染色呈阳性,碱性磷酸酶(ALP)活性检测对照组与诱导组比较差异显著(P﹤0.05),ALP基因和骨形态发生蛋白基因(BMP2)的mRNA表达量升高.研究表明,鸡AMSCs具有分化为多种细胞的潜能.
- 唐小洪叶亚琼李道通马浩然欧阳丹陈健马勇江张媛李玉谷
- 关键词：间充质干细胞分化诱导
- miR-23b-3p对3T3-L1前脂肪细胞增殖与分化的影响
- 为探讨miR-23b-3p对3T3-L1前脂肪细胞增殖和成脂分化的影响,通过化学合成的miR-23b-3p模拟物mimic和抑制物inhibitor成功转入3T3-L1前脂肪细胞后,利用CCK-8法和流式细胞术检测miR...
- 徐立凤禹小芳张丽华欧阳丹马勇江张媛李玉谷
- 关键词：3T3-L1前脂肪细胞细胞增殖细胞分化
- 文献传递
- 小鼠Ghrelin基因真核表达质粒的构建及对3T3-L1前脂肪细胞增殖的影响被引量：2
- 2015年
- 为构建小鼠Ghrelin基因的真核表达质粒,并研究Ghrelin对3T3-L1细胞增殖的影响,以小鼠肠cDNA为模板,通过PCR扩增Ghrelin基因,插入到pMD18-T克隆载体中。对经鉴定的重组质粒pMD-Ghrelin进行双酶切,将目的基因连接到经同样双酶切的真核表达载体pcDNA3.1(+)上。重组质粒经双酶切分析和测序鉴定后,用Lipofectamine 3000转染试剂将重组表达质粒转染到3T3-L1细胞中,采用qRT-PCR和Real-time PCR检测Ghrelin基因在3T3-L1细胞中的表达。采用CCK-8法检测细胞的生长活力;流式细胞术检测Ghrelin基因对细胞周期和凋亡的影响;采用Real-time PCR检测部分周期相关基因的mRNA表达水平。结果显示,成功构建了小鼠Ghrelin基因的真核表达质粒pcDNA3.1(+)-Ghrelin,并能在3T3-L1细胞中得到很好地表达,其表达倍数是空质粒组的5倍(P<0.01);转染后第48、72和96小时,Ghrelin转染组3T3-L1细胞的生长活力明显高于空载体组(P<0.05或<0.01);转染后第24小时,Ghrelin转染组S期细胞数量明显高于空载体组(P<0.05);Ghrelin过表达对3T3-L1细胞的凋亡无明显影响(P>0.05)。qRT-PCR结果显示,Ghrelin转染组细胞的c-myc(P<0.05)、E2F1、CDK2(P<0.05)等mRNA的表达量也明显高于空载体组,P53表达低于空载体组,差异显著(P<0.05)。以上结果表明,Ghrelin过表达能显著促进3T3-L1细胞的增殖,但不影响凋亡。
- 陈健叶亚琼欧阳丹马浩然马勇江张媛李玉谷
- 关键词：GHRELIN基因真核表达质粒3T3-L1细胞细胞增殖小鼠
- miR-23b-3p对3T3-L1前脂肪细胞增殖和成脂分化的影响被引量：3
- 2017年
- 为探讨miR-23b-3p对3T3-L1前脂肪细胞增殖和成脂分化的影响,通过化学修饰的miR-23b-3p模拟物成功转入3T3-L1前脂肪细胞后,利用CCK-8法和流式细胞术检测过表达miR-23b-3p对3T3-L1前脂肪细胞增殖的影响;并通过实时荧光定量PCR和Western blot检测细胞周期基因CyclinD1和CDK4以及成脂标志基因PPARγ和FABP4的表达情况;油红O染色测定甘油三酯积累情况。结果显示,过表达miR-23b-3p抑制3T3-L1前脂肪细胞增殖,导致细胞G1期阻滞,CyclinD1、CDK4在mRNA和蛋白水平极显著下调;在3T3-L1前脂肪细胞成脂分化过程中,miR-23b-3p的表达水平上调;过表达miR-23b-3p促进3T3-L1前脂肪细胞甘油三酯积累,PPARγ、FABP4在mRNA和蛋白水平显著或极显著上调。结果表明,miR-23b-3p能够抑制3T3-L1前脂肪细胞增殖并促进其分化为成熟脂肪细胞。
- 徐立凤禹小芳张丽华欧阳丹马勇江张媛李玉谷
- 关键词：3T3-L1前脂肪细胞细胞分化细胞增殖
