赵冠杰
- 作品数:4 被引量:5H指数:2
- 供职机构:福州大学更多>>
- 发文基金:福建省科技计划重点项目福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 用H401阴离子交换树脂分离纯化发酵液中的扁桃酸被引量:1
- 2007年
- 通过比较不同类型阴离子交换树脂的吸附性能,筛选出对(R)-扁桃酸富集率高、杂质吸附率较低的H401阴离子交换树脂。最适动态吸附条件为:上柱液pH6.0~6.5,流速1.0BV/h;最适动态洗脱条件为:洗脱液为1.0%盐酸,洗脱流速0.5BV/h。优化条件下,发酵液中(R)-扁桃酸的总提取率为95%,最终产物的纯度达95%,ee值98.5%。——
- 史迎莹严芬赵冠杰郭养浩
- 关键词:发酵液离子交换分离纯化
- 枇杷属ITS遗传多样性研究及醇腈酶的分离纯化、基因克隆和表达
- 赵冠杰
- 关键词:枇杷ITS系统发育基因克隆
- 枇杷核醇腈酶的高效分离纯化及酶学性质研究被引量:2
- 2011年
- 以枇杷"解放钟"的核为原料,根据醇腈酶高耐热性的特点,采用60℃热处理-DEAE-Sepharose FF柱分离组合技术,从枇杷核中获得电泳纯的醇腈酶.最终纯化酶的比活力达到232 U.mg-1,酶活力回收率高达64%.所制备的的R型醇腈酶具有高度的光学选择性,催化苯甲醛与丙酮氰醇反应产生R型扁桃腈,对映体过量值达到97.2%.酶学性质研究表明:该酶为单聚体,分子量约63kDa;最适反应温度40℃,最适反应pH为5.0;在本实验条件(30℃、pH5.0)下,Km为0.55 mmol.L-1,Vmax 0.80 mmol.L-1.min-1.该酶具有良好的热稳定性,60℃预处理3 h,酶活力保持不变,70℃预处理3 h,酶保留活力仍达到75%.
- 赵冠杰杨志强郭养浩
- 关键词:枇杷分离纯化酶学性质
- 枇杷醇腈酶基因的克隆及结构分析被引量:2
- 2011年
- 根据已知的杏仁、黑樱桃醇腈酶基因序列设计了一对同源引物,扩增得到枇杷醇腈酶基因的部分序列.分别设计了三条基因特异性引物和一条基因非特异性引物,采用改进的SEFA PCR方法,进行上下游未知序列的扩增,成功地获得包括启动子区、转录终止子在内的枇杷醇腈酶基因序列,全长5.5 kbp.所得醇腈酶基因含有4个外显子和3个内含子.编码的氨基酸残基序列包括25个氨基酸残基的信号肽和527个氨基酸残基的成熟酶蛋白.采用重叠延伸PCR方法将4个外显子连接获得了连续的醇腈酶编码基因,与pET27b(+)质粒成功构建表达载体,转化Rosetta(DE3).表达的醇腈酶大部分以包涵体形式存在,最终表达的酶活力为1.2 U.mL-1.
- 赵冠杰白锴凯郑允权郭养浩
- 关键词:枇杷基因克隆