陶红梅
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：华中科技大学生命科学与技术学院中英 HUST-RRes 基因工程和基因组学联合实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 中国春小麦puroindoline a基因的克隆及其真核表达载体的构建
- 2007年
- 目的:puroindoline(pin)基因在控制麦类作物的籽粒硬度中起着重要作用。构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-pina-gfp,为pina基因在哺乳细胞中的表达提供基础。方法:利用PCR方法从中国春小麦基因组中克隆到了pina基因,将其插入真核表达载体pcDNA3.1(+)-gfp,用PCR和酶切鉴定重组子。结果:PCR和酶切鉴定表明,所构建的真核表达重组质粒为pcDNA3.1(+)-pina-gfp;将该片段克隆到pCF-T载体中,经测序验证,表明其为目的基因。结论:构建的pina基因真核表达载体pcDNA3.1(+)-pina-gfp为pina基因在哺乳动物细胞中的表达提供了基础。
- 陶红梅罗立廷朱婷婷杨广笑何光源
- 关键词：PUROINDOLINE中国春小麦基因克隆真核表达载体
- 中国春硬度基因的克隆与序列分析被引量：1
- 2007年
- 目的:克隆、分析puroindoline a(Pina)、puroindoline b(Pinb)和grain softness protein(gsp)这三种控制小麦籽粒硬度的主要基因。方法:根据已报导的小麦3种基因的保守序列,设计合成了3对特异性引物,对六倍体软质小麦中国春基因组DNA进行基因扩增、克隆和序列测定,得到了3个基因的全长。结果:其ORF分别是447bp、447bp和495bp,编码的蛋白质全长分别为148aa、148aa和164aa。3种蛋白质都含有谷类作物所特有的19aa的信号肽,10个半胱氨酸所形成的5个二硫键结构,PINA和PINB蛋白有麦类作物所特有的富含色氨酸的结构域。结论:与粗山羊草的pina、pinb和gsp相比较,其核苷酸同源性为99.8%、95.8%和99.4%,氨基酸的同源性高达99.3%、96.6%和98.8%。3种与硬度相关的基因的分离与克隆丰富了小麦种质遗传资源库,为弄清影响小麦籽粒硬度的机制及其抗菌活性奠定了基础。
- 罗立廷陶红梅杨广笑何光源郑重
- 关键词：PUROINDOLINEGSP籽粒硬度克隆
