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张亚丽
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供职机构:
杭州师范大学
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合作作者
黄黎锋
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王秋艳
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李海峰
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蓝袁洋
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短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)糖基转移酶基因的克隆、序列分析及表达
2012年
为获得具有催化活性的糖基转移酶纯酶,本研究以短小芽孢杆菌基因组DNA为模板,利用简并PCR技术扩增到基因(GT-A)全长序列.该序列全长1 287bp、编码423个氨基酸,分子量约为49.2KD.经序列分析,该基因属于糖基转移酶基因.根据GT-A基因开放阅读框序列设计引物,构建了原核表达重组质粒GTA-pet28a,并在大肠杆菌BL21(DE3)中成功诱导出了一个约50kD的融合蛋白.纯化后测定其糖基转移酶活性,与37℃相比,80℃的反应温度其活性能提高3.4倍左右.研究结果表明,该酶是一种具有应用潜力的嗜高温糖基转移酶.
王秋艳
蓝袁洋
李海峰
张亚丽
黄黎锋
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短小芽孢杆菌
原核表达
糖基转移酶
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