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食管鳞癌组织芯片中MTA1蛋白表达的免疫组织化学研究被引量：3: 2007年; 目的研究食管鳞癌组织中转移相关基因MTA1蛋白定位及表达水平的改变及与食管鳞癌进展、转移的关系。方法应用食管鳞癌组织芯片通过免疫组织化学染色研究MTA1蛋白在食管癌中的表达情况。结果MTA1蛋白在食管鳞癌组织中主要定位于胞核,在淋巴结转移灶中出现胞浆与胞核同时着色。正常组织与重度不典型增生、原位癌及癌组织之间差异有统计学意义,在食管鳞癌不同进展阶段的组织中MTA1表达逐渐升高,并且出现异位表达。结论MTA1与食管鳞癌的侵袭和转移高度相关,在食管鳞癌的发展过程中可能发挥着重要作用,可作为判断食管癌侵袭及转移能力的辅助因子。; 钱海利李云峰于静宋崇文吕宁张雪燕梁萧付明林晨; 关键词：食管鳞癌 MTA1 组织芯片

肿瘤细胞CAR表达水平与5型腺病毒转导效率的关系被引量：2: 2006年; 目的：通过体外、体内实验探讨肿瘤细胞柯萨奇腺病毒受体（coxsackie adenovirus receptor，CAR）表达水平与腺病毒转导效率的关系，为腺病毒相关的生物制剂在临床个体化应用提供实验依据。方法：将载有绿色荧光蛋白的Ad5型腺病毒（Ad．GFP）以100MOI、200MOI分别感染人食管癌细胞系KYSE510、KYSE150、EC9706、人宫颈癌细胞系HeLa、人卵巢癌细胞系SKOV3、人肝癌细胞系HepG2和人肺癌细胞系A549，感染后48h通过流式细胞术检测Ad—GFP对不同细胞系的转导效率。采用Western blotting方法检测这些细胞中CAR的表达水平。将HeLa、A549、SKOV3、EC9706细胞分别接种于裸鼠腋下，接种细胞数分别为3×10^6、3×10^6、3×10^6、2×10^6，建立裸鼠移植瘤模型。待肿瘤长径达5～7mm时，在裸鼠移植瘤内注射Ad—GFP，每次1×10^9PFU，间隔48h注射第2次。第2次注射后48h处死裸鼠，剖取瘤组织，荧光显微镜观察冰冻切片中GFP的表达情况以判定腺病毒在瘤体内的转导效率，同时用免疫组化法检测瘤组织内的CAR表达水平。结果：200MOIAd—GFP感染A549、HeLa、HepG2、KYSE150细胞48h后分别有92．67％、89．31％、84．98％、74．59％的细胞表达GFP；而SKOV3、KYSE510、EC9706细胞中腺病毒的转导效率明显降低，GFP阳性率分别为30．06％、27．40％、18．93％；各种细胞的CAR蛋白表达水平与腺病毒的转导效率呈正相关。注射Ad—GFP的裸鼠移植瘤组织中可见HeLa、A549瘤组织内有明显的点状绿色荧光，而SKOV3、EC9706瘤组织内表达GFP的细胞数明显少于前两种瘤组织；HeLa、A549裸鼠移植瘤组织内大多数瘤细胞高表达CAR（卅），SKOV3、EC9706移植瘤组织内CAR表达水平较低（＋或-），表明瘤体内CAR表达水平与Ad．GFP的转导效率也呈正相关。结论：体内外实验均显示肿瘤细胞的CAR表达水平与5型腺病毒转导效率密切相关。肿瘤患者治疗前检测�; 王海娟李云峰钱海利张雪燕付明梁萧詹启敏林晨; 关键词：肿瘤腺病毒基因治疗

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李云峰

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