杜光
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
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- 氟中毒对体外培养破骨细胞数量及骨吸收功能的影响被引量：4
- 2011年
- 目的 观察氟中毒对体外培养破骨细胞数量及骨吸收功能的影响,探讨其作用机制.方法 机械分离法作用于新生SD大鼠四肢长骨,于TC199培养液（含10%胎牛血清）中获得破骨细胞和骨髓基质细胞.将破骨细胞接种于96孔培养板和象牙片培养,而骨髓基质细胞接种于6孔培养板培养,分别于2 h后换液并染氟（氟化钠）,对照组、低氟组、中氟组、高氟组染氟剂量分别为0、2.5×10-5、5.0×10-5、10.0×10-5mol/L.培养2、5d后对培养板中破骨细胞进行抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色,光镜下计数破骨细胞数量;培养5 d后象牙片经1%甲苯胺蓝染色,光镜下分析破骨细胞骨吸收陷窝面积.骨髓基质细胞染氟作用8 h后提取总RNA,实时荧光定量PCR法检测细胞核因子κβ受体活化因子配体（RANKL）和骨保护素（0PG）mRNA表达水平.结果 ①体外培养2 d时,对照组、低氟组、中氟组、高氟组破骨细胞数量分别为（337.5 4-70.5）、（447.5 ±43.4）、（472.9±34.8）、（475.3±24-3）个/孔,各染氟组明显高于对照组（P均〈0.05）;体外培养5 d时,对照组、低氟组、中氟组、高氟组破骨细胞数量分别为（92.5±22.1）、（123.0±26.4）、（135.5 ±22.2）、（136.9 ±23.0）个/孔,各染氟组明显高于对照组（P均〈0.05）.②体外培养5 d时,对照组、低氟组、中氟组、高氟组破骨细胞骨吸收陷窝面积分别为（0.088±0.030）、（0.100 ±0.018）、（0.152±0.015）、（0.242±0.031）mm2/片,中氟组和高氟组明显高于对照组（P均〈0.05）.③对照组、低氟组、中氟组、高氟组骨髓基质细胞RANKL/OPG mRNA表达比值分别为100.00±56.02、144.95±97.21、223.25 ±184.48、193.98 ±137.93,中氟组和高氟组明显高于对照组（P均〈0.05）.结论 氟中毒可引起体外培养破骨细胞数量增多,促进其细胞分化及骨吸收活性,该作用可能与其上调 RANKL/OPC,mRNA表达比值有关.
- 杜光喻茂娟徐小雅金慰芳高建军
- 关键词：氟化物中毒细胞培养技术骨保护素
- 氟铝及联合作用对体外培养大鼠破骨细胞数量及骨吸收功能的影响被引量：1
- 2013年
- 目的观察单纯氟、铝及氟铝联合作用对体外培养大鼠破骨细胞功能的影响，探讨其作用机制。方法机械分离法作用于新生SD大鼠四肢长骨，于TCl99培养液（含10％胎牛血清）中获得破骨细胞和骨髓基质细胞，将破骨细胞接种于96孔培养板和象牙薄切片培养，骨髓基质细胞接种于6孔培养板培养。2h后换液并染毒（氟化钠和氯化铝），分为对照组（氟化钠和氯化铝浓度均为0mol／L）、氟组（氟化钠1．0×10^-4mol／L）、铝组（氯化铝1．0×10。mol／L）和氟铝联合组（氟化钠1．0×10^2mol／L，氯化铝1．0×10^-5mol／L）。培养5d后，对培养板中破骨细胞进行抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色，光镜下检查破骨细胞数目；象牙薄切片经l％甲苯胺蓝染色，光镜下分析破骨细胞骨吸收陷窝面积。骨髓基质细胞染毒培养8h后提取总RNA，实时荧光PCR法测定骨保护素（OPG）和细胞核因子KB受体活化因子配体（RANKL）的表达量水平。结果①氟、铝、氟和铝的交互作用对破骨细胞数量均有影响（F值分别为7．15、6．56、7．98，P均〈0．05），氟组、铝组及氟铝联合组破骨细胞数量[（136．9±22．99）、（135．4±23．5）、（163．0±24．4）个／孔]均高于对照组[（92．5±22．1）个／孔，P均〈0．05]，氟铝联合组高于氟组和铝组（P均〈0．05）。②氟组、铝组及氟铝联合组对破骨细胞骨吸收陷窝面积均有影响（F值分别为10．47、12．64、14．29，P均〈0．05），氟组、铝组及氟铝联合组骨吸收陷窝面积[（0．242±0．031）、（0．293±0．026）、（0．333±0．016）mm2／片]均高于对照组[（0．088±0．030）mm2／片，P均〈0．05]，氟铝联合组高于氟组和铝组（P均〈0．05）。③氟、铝、氟和铝的交互作用对RANKL／OPGmRNA表达量的比值均有影响（F值分别为8．15、15．38、23．59，P均〈0．05），氟组、铝组、氟铝
- 杜光喻茂娟徐小雅金慰芳高建军
- 关键词：铝化物细胞
