王兴顺
- 作品数：3 被引量：27H指数：2
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- 重组柞蚕抗菌肽AD对E.coli抗菌机制研究被引量：3
- 2014年
- 目的利用透射电子显微镜和流式细胞仪等技术手段,对重组柞蚕抗菌肽AD抗菌作用机制进行初步研究。方法用微量肉汤法鉴定重组柞蚕抗菌肽AD对E.coli敏感质控标准菌株ATCC25922和产β-内酰胺酶菌株ATCC35218的抑菌作用后,利用透射电子显微镜观察经重组柞蚕抗菌肽AD处理前后E.coli超微结构变化,再用流式细胞Ca2+荧光探针技术检测经重组柞蚕抗菌肽AD处理前后E.coli细胞膜内游离钙离子浓度的变化。结果微量肉汤法证明重组柞蚕抗菌肽AD对E.coli敏感株ATCC25922和耐药株ATCC35218的MIC值均为8μg/m L;透射电镜观察到重组柞蚕抗菌肽AD对E.coli的作用主要表现为破坏细菌胞膜的完整性;流式细胞Ca2+荧光探针检测发现,经重组柞蚕抗菌肽AD作用后,细菌胞内表面上的二价阳离子Ca2+浓度增高。结论重组柞蚕抗菌肽AD对E.col i的抗菌机制可表现为膜完整性的破坏,并伴随胞内Ca2+浓度的增高。
- 张倩邓平建王兴顺李浩杨小柯耿艺介
- 关键词：抗菌肽透射电子显微镜流式细胞技术
- 抗菌肽抗菌机制及其应用研究进展被引量：23
- 2012年
- 抗菌肽是一类小分子肽,具有广谱的抗菌活性。以往对抗菌肽抗菌机制的研究主要集中在细菌细胞膜的作用上,包含"桶板"模型、"毯式"模型,"环形孔"模型和"凝聚"模型。近年来相继发现某些抗菌肽可以作用于细菌细胞内部,与核酸物质结合,阻断DNA复制、RNA合成;影响蛋白质合成;抑制隔膜、细胞壁合成,阻碍细胞分裂;抑制胞内酶的活性。本文从胞内机制和胞外机制两个角度对抗菌肽的抗菌机制进行综述,以期阐明各类抗菌肽的作用机制,为进一步研究菌株耐药性、杀菌效果及其杀菌机制提供科学根据。
- 王兴顺耿艺介李文楚邓平建
- 关键词：抗菌肽抗菌活性
- 重组柞蚕抗菌肽AD的纯化及鉴定被引量：1
- 2015年
- 目的从重组柞蚕抗菌肽AD毕赤酵母发酵液中分离纯化出抗菌肽纯品,并对其进行纯度、分子量和抗菌作用的鉴定。方法用离子交换和疏水层析法对发酵液中的重组柞蚕抗菌肽AD进行分离纯化,用高效液相色谱法分析产物的纯度,再用基质辅助激光解析—飞行时间质谱仪对产物进行分子量鉴定,并结合传统微量肉汤稀释法和流式细胞术分析重组柞蚕抗菌肽AD纯品对E.coli敏感株及耐药株的抗菌作用。结果重组柞蚕抗菌肽AD经离子交换和疏水层析纯化后的纯度达到98.40%,分子量为4068.15Da,与所设计的重组柞蚕抗菌肽AD大小相近。所纯化出的重组柞蚕抗菌肽AD对E.coli的敏感株ATCC25922和产β-内酰胺酶耐药株株ATCC35218的抗菌作用均为MIC 8μg/m L,而头孢他啶和氨苄西林对耐药株ATCC35218的MIC的值分别为8μg/m L和>32μg/m L。结论成功纯化分离出具有自主知识产权的重组柞蚕抗菌肽AD,其对E.coli敏感株和耐药株具有相同的抗菌效果。
- 耿艺介张倩王兴顺李浩杨小柯李迎慧黄自然邓平建
- 关键词：高效液相色谱流式细胞术
