- 胃癌细胞表面ALDH1表达及ALDH1^+细胞的“干性”鉴定被引量：2
- 2018年
- 目的检测胃癌细胞系的乙醛脱氢酶1(ALDH1)表达,鉴定ALDH1^+细胞生物学特性。方法采用Aldefluor实验方法,通过流式细胞仪检测胃癌细胞系MGC-803、BGC-823及MKN-45中ALDH1的活性表达;选取MGC-803细胞系,分选出ALDH1^+和ALDH1^-细胞,进行分化潜能、平板克隆、耐药性、干性相关基因检测及裸鼠成瘤实验。结果MGC-803、BGC-823及MKN-45中ALDH1的表达比例为(13.00±1.34)%、(5.80±2.15)%及(36.5±5.4)%;分选出ALDH1^+、ALDH1^-细胞组,含血清培养1周后,ALDH1^+的表达比例为21.2%和3.9%,ALDH1^+细胞具有不对称分裂能力;ALDH1^+细胞组克隆形成率为(42.63±0.63)%,高于ALDH1^-细胞组(18.5±2.04)%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);相同氟尿嘧啶浓度下,ALDH1^+组生长抑制率均低于ALDH1^-组,差异有统计学意义(P<0.05);接种5×10~3个ALDH1^+及ALDH1^-细胞于小鼠皮下成瘤,与ALDH1^-细胞比较,ALDH1^+细胞成瘤率高。两组肿瘤体积比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论胃癌细胞系普遍存在ALDH1的活性表达,ALDH1^+细胞具有干细胞生物学特性,可能提供胃癌新的诊断和治疗途径。
- 王一刘丹丹向勇平刘理金姜伟李锦毅
- 关键词：胃癌细胞系ALDH1
- 全反式维A酸对胃癌干细胞相关基因CD133、Sox2及GSK3B表达的影响被引量：3
- 2017年
- 目的探讨全反式维A酸(all-trans retinoic acid,ATRA)对胃癌干细胞相关基因CD133、Sox2及GSK3B表达的影响,为胃癌治疗提供新的切入点。方法建立人胃癌裸鼠移植瘤模型,分为对照组、氟尿嘧啶组、ATRA组、氟尿嘧啶+ATRA组,采用ATRA腹腔注射,观察裸鼠一般状况,取出肿瘤组织,HE染色,检测各组胃癌细胞坏死情况;采用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、实时定量PCR方法,分析检测CD133mRNA、Sox2mRNA及GSK3BmRNA基因表达,并通过免疫组化法检测CD133、Sox2及GSK3B蛋白表达。结果与对照组相比较,氟尿嘧啶组、ATRA组、氟尿嘧啶+ATRA组肿瘤体积缩小,差异有统计学意义(P<0.05);氟尿嘧啶组、ATRA组、氟尿嘧啶+ATRA组高表达CD133、Sox2干细胞相关因子;ATRA组、氟尿嘧啶+ATRA组高表达GSK3B,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ATRA作用后胃癌干细胞标志物CD133、Sox2、GSK3B表达增加;CD133、Sox2、GSK3B表达增加可以抑制肿瘤细胞生长;ATRA老药新用对胃癌的治疗预后有一定的作用。
- 刘丹丹谢丽敏冯延静李锦毅王向党
- 关键词：胃癌干细胞CD133全反式维甲酸
- 不同浓度的抗菌肽RISE-AP12~对体外培养成骨细胞生物活性的影响被引量：6
- 2017年
- 目的通过检测不同浓度的抗菌肽RISE-AP12~对成骨细胞的增殖、迁移、成骨、蛋白合成、碱性磷酸酶活性(alkaline phosphatase,ALP)、细胞传代的影响,探讨抗菌肽局部给药的效应浓度范围。方法将不同浓度的抗菌肽(0、5、10、15、20、25、30 mg/L)加入预培养24 h的MG-63成骨细胞培养液中。孵育1、2、3、4、21 d后,倒置显微镜观察细胞的形态;1、2、3 d后检测其对细胞迁移能力的影响;2 d后检测其对细胞的增殖活性及蛋白合成的影响;4 d后检测其对细胞碱性磷酸酶活性的影响;21 d后检测其对细胞成骨钙结节的影响;细胞连续传代培养3次,检测其对细胞增殖活性的影响,显微镜观察成骨细胞形态。结果 0~20 mg/L抗菌肽对成骨细胞的形态、增殖、迁移、钙结节、蛋白合成、碱性磷酸酶活性及细胞传代均无影响;而25~30mg/L抗菌肽使成骨细胞的形状不规则、死亡增多,使成骨细胞形成钙结节的量减少,抑制细胞的增殖和蛋白合成,促进碱性磷酸酶的活性,细胞传代过程中细胞增殖活性降低、形状改变、死亡增多。结论在抗菌肽抑菌(10 mg/L)、杀菌(20 mg/L)有效浓度内,抗菌肽对细胞的生物活性没有影响,所以10~20 mg/L抗菌肽可用作局部用药。
- 谢丽敏刘丹丹宗菲杨德圣
- 关键词：成骨细胞抗菌肽细胞培养
