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日本脑炎病毒囊膜蛋白单克隆抗体的制备及特性分析被引量：3: 2016年; 将日本脑炎病毒(JEV)囊膜蛋白Cap-ED3重组蛋白免疫BALB/c雌鼠,应用细胞融合技术制备单克隆抗体,经ELISA筛选获得4株稳定分泌识别JEV ED3蛋白单抗的杂交瘤细胞,命名为1B10、3F5、4H1和5F9。这4株单抗在Western blot和间接免疫荧光试验中均能特异识别JEV NJ2008株。制备4株单抗的小鼠腹水,5F9效价最高,为1∶409 600。空斑减少中和试验结果表明:4株单抗均没有中和活性。相加ELISA试验表明:4株单抗中3F5和4H1识别相同抗原表位,1B10、5F9分别识别其他的抗原表位,且差异较大。应用鸭坦布苏病毒(DTMUV)特异性抗原进行ELISA检测的结果表明:5F9识别的表位与DTMUV有交叉,其他3株识别的抗原表位与DTMUV无交叉。本研究获得了3株JEV囊膜蛋白特异性的单抗和1株识别JEV和DTMUV交叉抗原表位的单抗,为JEV抗原和抗体检测试剂盒的研制提供了良好的物质基础。; 倪慧王钰毛岩陈溥言杨梅曹瑞兵; 关键词：日本脑炎病毒囊膜蛋白单克隆抗体

日本脑炎病毒囊膜蛋白单克隆抗体的制备及特性分析: 流行性乙型脑炎是一种重要的虫媒性人兽共患病,该病的病原为日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV).该病自1934年在日本首次发现,中国、韩国、印度等多国相继出现了对JEV的报道.中国...; 倪慧王钰毛岩陈溥言杨梅曹瑞兵; 关键词：流行性乙型脑炎囊膜蛋白细胞融合

鸭坦布苏病毒XZ-2012株的分离鉴定与基因变异分析被引量：3: 2015年; [目的]2012年10月徐州地区某鸭场的樱桃谷种鸭突然发生产蛋下降,疑似鸭坦布苏病毒病。为了确诊病因,本试验进行了剖检与病原的分离鉴定。[方法]将病料匀浆处理后尿囊腔接种SPF鸡胚,分离病毒,接种BHK细胞培养,应用RT-PCR扩增病毒全基因,测序并进行基因进化分析。[结果]分离到一株鸭坦布苏病毒,命名为DTMUV XZ-2012株。该病毒株能适应鸡胚,无血凝活性,在BHK-21细胞上第5代的病毒滴度为5×104PFU·m L-1。测序结果表明该病毒株基因组全长为10 990 nt,编码的多聚蛋白含3 426个氨基酸。DTMUV XZ-2012株与BYD株、YY5株和JS_2010株等分离株的全基因同源性为98.5%~99.3%。与最早分离的BYD株等相比,XZ-2012株的基因变异主要分布于E基因、NS1基因、NS2基因和NS5基因,提示该病毒在自然界的流行存在一定的免疫压力。[结论]本试验成功分离鉴定了一株鸭坦布苏病毒,为鸭坦布苏病毒候选疫苗株的筛选及病毒分子流行病学研究提供了参考信息。; 王钰王经满曹瑞兵; 关键词：生物学特性

鸭坦布苏病毒NS1蛋白单克隆抗体的制备与鉴定: 引言鸭坦布苏病毒病又名鸭出血性卵巢炎,病原为鸭坦布苏病毒（Duck Tembusu Virus,DTMUV）。该病的特点为产蛋鸭采食、产蛋量下降和瘫痪;雏鸭以出现站立不稳,倒立不起等神经症状为主,给养鸭业造成了严重的经济...; 王钰曹瑞兵

猪流行性乙型脑炎病毒B细胞多表位抗原的表达及免疫原性分析: 2014年; 流行性乙型脑炎病毒(JEV)可引起猪的繁殖障碍性疾病。本文利用基因重组技术,选取JEV prM/M、E、NS1蛋白的6个B细胞抗原表位,设计B细胞多表位基因,构建原核表达质粒,在大肠杆菌BL21中表达融合重组蛋白rMEP。纯化的rMEP免疫小鼠,通过抗体、中和抗体及亚型检测研究其免疫原性。结果表明,rMEP在上清中高效表达,Western blot结果证实rMEP具有较好的抗原性。在小鼠免疫模型中,rMEP免疫组小鼠血清中产生较高水平的针对rMEP的抗体和特异性中和抗体,且rMEP可诱导产生IgG1和IgG2a抗体,但以IgG1为主。这些结果表明,构建的JEV B细胞多表位蛋白能够刺激小鼠产生较强的体液免疫应答,为研究JEV的多表位疫苗提供新的思路和参考。; 郑胜王经满王钰曹瑞兵陈溥言冯秀丽; 关键词：流行性乙型脑炎免疫原性

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王钰