赵莉娟
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
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- 相关领域：农业科学更多>>
- 奶山羊IL-1β在Sf9细胞中的表达
- 2011年
- 将CaIL-1β基因整个编码区cDNA亚克隆到杆状病毒载体pFastBac-HTb中,构建转移载体pFastBac-HTb-CaIL-1β,转座到宿主菌DH10 Bac中,在Kan+/Gm+/Tet+/X-gal/IPTG LB平板上筛选白色菌落,碱裂解法提取质粒即为穿梭载体Bacmid-CaIL-1β,转染Sf9细胞后获得有感染力的重组病毒re-Bac-CaIL-1β。重组病毒在Sf9细胞上来连续传代后,经Western blot检测,CaIL-1β主要表达于感染的Sf9细胞培养上清中。
- 姚婧赵莉娟敬晓棋赵光辉陈德坤
- 关键词：奶山羊IL-1ΒSF9细胞
- 奶山羊IL-22的原核表达
- 2010年
- 根据signal IP3.0信号肽分析软件分析结果,设计IL-22不含信号肽表达引物,PCR扩增获得奶山羊IL-22基因,连接表达载体pET-32a,重组质粒转化BL21感受态细胞。对阳性克隆进行诱导表达,对诱导温度、IPTG诱导浓度、诱导时间等条件进行优化,在最佳条件大量诱导蛋白表达。结果显示,在37℃、IPTG浓度为0.1mmol/L、诱导5 h可获得IL-22最大表达量,目的蛋白以包涵体形式存在,包涵体经洗涤、变性和复性,纯度可达90%以上。本研究为进一步探讨IL-22在奶山羊乳腺免疫中的作用奠定了基础。
- 赵莉娟姚婧韩炎森牟珊赵燕清陈德坤
- 关键词：奶山羊IL-22原核表达
