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车昌艳
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
供职机构:
中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
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合作作者
王树蕙
中国医学科学院北京协和医学院基...
赵艳
中国医学科学院北京协和医学院基...
张蕾
中国医学科学院北京协和医学院基...
段素素
中国医学科学院北京协和医学院基...
张云
中国医学科学院北京协和医学院基...
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刘力
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车昌艳
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细胞与分子免...
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2008
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人细胞因子受体样因子3在真核及原核细胞中的表达
被引量:1
2008年
目的:观察CRLF3蛋白在293T细胞中的表达及亚细胞定位,并在大肠杆菌中表达和纯化了重组CRLF3蛋白。方法:将真核表达载体pCMV-myc-CRLF3瞬时转染293T细胞,转染24 h和48 h后免疫荧光染色,共聚焦显微镜观察蛋白表达及定位;构建原核表达质粒pGEX-4T-1-CRLF3,实现插入基因的融合表达,经GST亲合层析纯化蛋白。结果:CRLF3蛋白在293T细胞中高效表达,主要分布在细胞质和细胞膜;成功构建了表达CRLF3融合蛋白的原核表达载体,并在大肠杆菌内高效表达,纯化后得到Mr约为74 000的融合蛋白。结论:在真核细胞中过表达的CRLF3蛋白主要定位在细胞质和细胞膜;获得了重组GST-CRLF3融合蛋白,为进一步探讨CRLF3的功能奠定基础。
赵艳
段素素
车昌艳
张蕾
张云
王树蕙
刘力
关键词:
真核表达
原核表达
蛋白纯化
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