郭敏利
- 作品数：2 被引量：15H指数：1
- 供职机构：大连工业大学生物工程学院更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学更多>>
- 丙酸杆菌基因敲除体系的构建及其应用
- 2013年
- 目的丙酸杆菌基因敲除体系的构建及其验证。方法利用PCR技术扩增丙酸杆菌hemE基因上、下游约500 bp左右片段,构建由上下游同源臂及hygB抗性基因组成的打靶质粒pPK705-arms-hygB。将打靶质粒转入丙酸杆菌感受态细胞,利用同源重组技术定向敲除hemE基因,并通过连续传代培养,消除外源质粒。最后,利用PCR技术验证丙酸杆菌染色体和打靶质粒发生同源重组。结果成功敲除了丙酸杆菌hemE基因。结论打靶质粒pPK705-arms-hygB能够与宿主基因组DNA发生重组,对稳定地改善其整个代谢途径的研究奠定了方法学基础。
- 郭敏利朴永哲王世全黄玮周华成杨洪泽唐丽娜
- 关键词：基因敲除
- 大麦发芽过程中蛋白质组的变化研究被引量：15
- 2013年
- 通过双向电泳技术监测大麦发芽过程中水溶蛋白质组的变化,明确大麦发芽过程中蛋白质组的变化规律,为麦芽制造提供一定理论依据。以澳麦"schooner"为研究对象,提取其水溶蛋白进行双向电泳分析,结合分析软件监测大麦发芽过程中蛋白质组的变化。结果显示,本实验检测出大麦种子中大约有804种蛋白质,发芽过程中有424种蛋白质未发生变化,379种蛋白质降解消失或浓度降低,另有77种新的蛋白质产生。结果表明,进一步证实浸麦阶段主要是蛋白质的降解过程;发芽前期蛋白质的降解和合成转化较为缓和,发芽中期(48～72h)蛋白质的降解最为旺盛;发芽后期蛋白质的变化基本趋于平衡。
- 刘宝祥朴永哲翟明昌董亮郭敏利周华成赵长新
- 关键词：大麦发芽蛋白质组双向电泳
