您的位置： 专家智库 > >

胡文丽

作品数：4 被引量：2H指数：1
供职机构：云南农业大学动物科学技术学院更多>>
发文基金：国家自然科学基金云南省高端科技人才引进计划项目教育部科学技术研究重点项目更多>>
相关领域：农业科学生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 4篇中文期刊文章

领域

  • 3篇农业科学
  • 2篇生物学

主题

  • 3篇IFN-Γ
  • 2篇基因
  • 2篇干扰素
  • 2篇Γ基因
  • 2篇IFN-Γ基...
  • 1篇单个核细胞
  • 1篇多克隆
  • 1篇多克隆抗体
  • 1篇疫苗
  • 1篇荧光
  • 1篇荧光定量
  • 1篇荧光定量PC...
  • 1篇荧光定量PC...
  • 1篇原核
  • 1篇原核表达
  • 1篇致病性禽流感
  • 1篇偶联
  • 1篇偶联物
  • 1篇禽流感
  • 1篇禽流感疫苗

机构

  • 4篇云南农业大学

作者

  • 4篇陈培富
  • 4篇胡文丽
  • 2篇马志亮
  • 2篇孙亭亭
  • 2篇王皓然
  • 2篇冀斌
  • 1篇杨亮宇
  • 1篇鲁琼芬

传媒

  • 2篇动物医学进展
  • 1篇生物技术通报
  • 1篇中国畜牧兽医

年份

  • 2篇2015
  • 2篇2014
共 4 条 记 录，以下是 1-4
全选 清除 导出
排序方式：
武定鸡IFN-γ基因-316A/GSNP对H5N1亚型高致病性禽流感灭活疫苗免疫效果的影响
2015年
为探讨γ干扰素(IFN-γ)基因-316A/G SNP对云南地方鸡品种武定鸡接种H5N1亚型高致病性禽流感(HPAI)灭活疫苗效果的影响,随机选取100只同日龄母源抗体阴性的武定鸡,应用PCR结合DNA测序确定其IFN-γ基因-316A/G SNP分布状况,同时应用血凝抑制试验(HI)测定免疫前和再次免疫后血浆特异抗体水平,随后采用卡方检验总样本基因型频率是否处于Hardy-Weinberg平衡,并采用最小二乘分析检查基因型组间抗体水平差异。结果发现,该试验样本符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05),并且存在随着A取代G抗体水平呈逐渐升高的趋势,即与GG基因型(n=20,7.90±0.343)相比,AG基因型(n=56,8.62±0.205)的抗体水平升高不显著(P>0.05),但AA基因型(n=24,9.04±0.313)的抗体水平升高显著(P=0.0157<0.05)。结果表明,IFN-γ基因-316A/G SNP与武定鸡HPAI特异性抗体应答水平存在关联性,这对培育AA基因型抗病品系和制定合理的HPAI免疫程序具有积极的指导意义。
王皓然胡文丽杨春艳王钊哲陈培富杨亮宇
关键词：武定鸡Γ干扰素高致病性禽流感疫苗
抗STa多克隆抗体的制备、鉴定和纯化被引量：2
2015年
产肠毒素大肠杆菌(ETEC)可引起人及动物急性腹泻,其关键毒力因子为耐热肠毒素(ST)。由于ST是一种具有强烈毒性但缺乏免疫原性的小分子肽,如何在保持其免疫原性的同时减弱其毒性已成为制备ST类毒素疫苗的研究热点。本试验以利凡诺法提纯兔血清白蛋白(RSA),经0.2%戊二醛活化,再与人工合成的甲醇可溶性STa偶联,十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果显示获得分子质量约108.5ku的完全抗原。用该偶联物免疫新西兰白兔4次,采集抗血清并用Protein A/G琼脂糖小珠进行纯化,斑点酶联免疫吸附试验(dot-ELISA)和免疫印迹(Western blotting)结果显示抗血清效价均为1∶400。试验结果表明抗STa多克隆抗体成功制备,这为筛选ST结构类似物做有益的铺垫。
胡文丽匡雪简宗辉王皓然段锐锐陈培富
关键词：偶联物多克隆抗体
红色原鸡外周血单个核细胞IFN-γ的诱导表达及其荧光定量PCR检测
2014年
为建立检测红色原鸡外周血单个核细胞(PBMC)中干扰素γ(IFN-γ)mRNA表达水平的方法,通过优化刀豆蛋白A(Con A)诱导PBMC表达IFN-γ的条件,采用RT-PCR方法以3-磷酸甘油脱氢酶(GAPDH)基因为内参扩增IFN-γ基因,插入克隆载体pMD18-T分别构建重组质粒pMD-IFN-γ和pMD-GAPDH,以其作为标准品采用SYBR Green I染料法建立荧光定量PCR检测方法,并将该方法应用于34只红色原鸡PBMC IFN-γ表达量的检测。结果发现,PBMC在20μg/mL Con A刺激培养12-25 h时IFN-γ处于高表达水平;标准品质粒pMD-IFN-γ和pMD-GAPDH分别在拷贝数6.72×102-6.72×109、3.94×102-3.94×109范围内与其对应的Ct值呈现良好的线性关系(R2>0.99),扩增产物的熔解曲线均只有特异的单峰,表明所用引物特异性强。在优化Con A诱导红色原鸡PBMC表达IFN-γ条件的基础上,建立了可用于定量检测红色原鸡PBMC IFN-γmRNA表达水平的荧光定量PCR方法。
孙亭亭冀斌马志亮胡文丽鲁琼芬张雄伟陈培富
关键词：CON荧光定量PCR外周血单个核细胞
红色原鸡IFN-γ基因的克隆及原核表达
2014年
应用能够选择性克隆同源双链DNA的方法(PCR+1)从刀豆蛋白A诱导的红色原鸡外周血淋巴细胞中扩增γ干扰素(IFN-γ)编码区基因,双酶切后连接至克隆载体pUC18。以阳性质粒为模板扩增IFN-γ成熟肽基因,连接至原核表达载体pProEXTMHTb,筛选出阳性重组质粒HTb-IFN-γ;重组质粒在大肠埃希菌BL21(DE3)中经IPTG诱导表达,表达产物通过SDS-PAGE和Western blot进行分析。结果表明,采用PCR+1方法扩增得到560bp IFN-γ编码区基因,成功连接至克隆载体并以此为模板扩增出473bp成熟肽基因,构建的重组表达质粒HTb-IFN-γ在BL21(DE3)中经IPTG诱导表达出分子质量约为21ku的IFN-γ。Western blot分析显示,表达的IFN-γ能够与抗IFN-γ多克隆抗体特异性反应,具有良好的免疫活性。
孙亭亭马志亮冀斌胡文丽陈培富
关键词：IFN-Γ原核表达
全选 清除 导出
共1页<1>
聚类工具0