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闫斌
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1
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供职机构:
西安交通大学医学院第二附属医院
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
董新
西安交通大学医学院第二附属医院
王岗
西安交通大学医学院第二附属医院
高亚
西安交通大学医学院第二附属医院
巩守平
西安交通大学医学院第二附属医院
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董新
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2012
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一种在体基因干扰技术研究神经嵴细胞向平滑肌细胞的分化
2012年
目的建立一种在体基因干扰技术研究神经嵴细胞向平滑肌细胞分化。方法使用鸡胚在体电转染的方法导入绿色荧光蛋白示踪或核内不均一核糖核蛋白A2/B1(heterogeneous nuclear ribonucleprotein A2/B1,hnRNPA2/B1)特异性吗啉基反义寡聚核苷酸(morpholino)干扰其基因表达。通过分析鸡胚的成活率及转染率确定在体转染的设备参数,之后将胚胎固定、包埋、冰冻切片并进行免疫组织化学染色,在荧光显微镜下观察神经嵴细胞的标记、迁徙及向平滑肌细胞的分化。结果转染电压为7.5V时胚胎成活率和转染率均较高,因此在本实验中作为标准电压。电转后6小时,右侧神经嵴细胞成功表达绿色荧光蛋白。第2天,神经嵴细胞开始向腮弓迁徙并达到第2、3鳃弓。hnRNPA2/B1特异性morpholino可以抑制hnRNPA2/B1的表达从而影响神经嵴细胞的迁徙和分化,导致鳃弓动脉平滑肌层形成障碍,最终破裂。结论鸡胚在体基因干扰技术被成功建立并可用来研究神经嵴细胞向平滑肌细胞分化。
王岗
闫斌
巩守平
高亚
董新
关键词:
神经嵴细胞
HNRNPA2/B1
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