刘传高
- 作品数：11 被引量：15H指数：3
- 供职机构：华南农业大学更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学环境科学与工程生物学更多>>
- H9N2亚型AIV不同攻毒方式排毒规律的研究被引量：3
- 2017年
- 为了研究H9N2亚型禽流感目前的流行情况,从广东省某鸡场的发病鸡中分离到一株H9N2亚型禽流感病毒(A/Chicken/Guangdong/1104/2014),遗传进化分析显示该毒株属于BJ/94-like谱系h9.4.2.5分支,与经典疫苗株的HA基因相似性为89.3~90.7%,通过点眼滴鼻、静脉注射、肌肉注射的方式攻毒SPF鸡研究其攻毒后的排毒规律。结果表明:病毒通过点眼滴鼻和静脉注射方式攻毒能够很好地感染SPF鸡,并在攻毒后第3天排毒率达到100%,但是随后几天排毒率逐渐下降,点眼滴鼻组在攻毒后第7天排毒率下降为0;肌肉注射组则没能有效感染SPF鸡,攻毒后第3~9天的排毒率为16.7%~33.3%。说明静脉注射是较好的攻毒方式,能有效感染SPF鸡,SPF鸡攻毒后第3~5天的排毒率达到100%。
- 余文兰梁柏刘郁夫刘传高马晓莉张俊俊刘永伦陈嘉
- 关键词：排毒规律神经氨酸酶
- 利用杆状病毒表达系统表达鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白
- 2017年
- 从GenBank下载传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因序列,根据昆虫细胞偏爱密码子对IBDV VP2基因进行密码子优化,化学合成优化后的VP2基因序列,然后构建杆状病毒表达载体pTri Ex-4-VP2,构建成功的重组杆状病毒pTri Ex-4-VP2转染sf9细胞,制备病毒原种,采用SDS-PAGE和Western blot方法鉴定VP2的免疫原性。结果显示:细胞感染Bac-VP2后,其细胞裂解蛋白在58 ku附近有1个条带,且该条带与IBD阳性血清发生特异性反应;间接免疫荧光试验(IFA)结果显示VP2基因能在Sf9细胞中表达;动物攻毒保护试验中,2次免疫重组VP2蛋白后能诱导14日龄SPF鸡产生对IBDV强毒攻击,保护率为60%。本研究为进一步研究IBDV VP2基因工程疫苗提供了物质基础。
- 任广彩刘传高黄妙容黄文科钟楚红刘郁夫陈瑞爱
- 关键词：传染性法氏囊病毒VP2蛋白
- 传染性法氏囊病病毒DNA疫苗及其构建方法
- 本发明涉及动物医药生物工程领域，具体而言，涉及一种传染性法氏囊病病毒DNA疫苗及其构建方法，所述DNA疫苗为包含IBDV VP2基因、鸡Akirin2基因和鸡GM‑CSF基因的三基因共表达载体，能够利用一个载体实现对IB...
- 陈瑞爱刘传高朱娇娇钟楚红
- 文献传递
- IBDV VP2与Gallus Akirin2真核双表达载体的构建及应用
- 2017年
- 为提高传染性法氏囊病(IBD)VP2DNA疫苗的免疫效力,将优化合成的IBDV VP2与Gallus Akirin2串联基因定向克隆至真核表达载体pTriEx-4,获得重组质粒pVP2-Akirin2。体外转染293T细胞,提取表达产物进行SDSPAGE和Western blot分析,结果显示:在58 000和35 000附近各有一蛋白条带,分别能与鸡IBD阳性血清和兔Akirin2多克隆抗体发生特异性反应。将pVP2-Akirin2与同期构建的pVP2对照质粒分别免疫SPF鸡,加强免疫2周后,攻IBDV BC6-85强毒,4d后统计保护率,并监测免疫过程中血清IBD抗体滴度和IBDV中和抗体滴度的动态变化,结果显示:SPF鸡二免后14d,pVP2-Akirin2组血清IBD抗体滴度和IBDV中和抗体滴度均极显著高于pVP2组(P<0.01),且对IBDV强毒株BC6-85攻击的保护率为75%,高于pVP2对照组(55%)。结果表明:Gallus Akirin2基因对IBD VP2DNA疫苗具有明显的免疫增强作用。
- 刘传高钟楚红任广彩朱娇娇赵大伟陈瑞爱
- 关键词：传染性法氏囊病VP2免疫增强
- 鸡GM-CSF基因对传染性法氏囊病病毒VP2 DNA疫苗的免疫调节作用
- 2017年
- 为了探讨鸡粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)基因对鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2 DNA疫苗诱导的免疫反应的影响,将pTriEx-4-VP2-GM-CSF质粒免疫SPF鸡,加强免疫2周后,进行IBDV强毒攻击,检测机体免疫相关指标。结果表明:鸡GM-CSF基因能够增强VP2 DNA疫苗诱导的特异性免疫反应,影响细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10的表达水平,对外周血淋巴细胞的增殖没有显著影响。这一结果提示鸡GM-CSF基因对IBDV VP2 DNA疫苗具有一定的免疫调节作用。
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- 关键词：GM-CSF传染性法氏囊病病毒VP2DNA疫苗
- IBD VP2 DNA疫苗及鸡Akirin2和GM-CSF对其免疫调节效果的研究
- Akirins是天然免疫信号通路TLR所必须的核蛋白，调控依赖NF-κB的基因转录，在免疫和炎症反应中不可或缺，是极具潜力的免疫增强基因。粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（Granulocyte macrophage col...
- 刘传高
- 关键词：DNA疫苗免疫调节特异性
- 鸡Akirin2和GM-CSF促进传染性法氏囊病病毒VP2基因DNA疫苗免疫效果的研究被引量：2
- 2017年
- 为提高鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因DNA疫苗的免疫效力,将IBDV VP2、鸡Akirin2和鸡GM-CSF三基因编码区串联后克隆到真核表达载体pTriEx-4上,用构建的pT-VP2-Akirin2-GM-CSF重组质粒体外转染293T细胞,然后提取表达产物进行SDS-PAGE分析。结果在58、35、22ku附近各有一蛋白条带。用pT-VP2-Akirin2-GM-CSF免疫SPF鸡,加强免疫2周后,攻IBDV BC6-85强毒,4d后统计保护率。结果发现,注射14d后,pT-VP2-Akirin2-GM-CSF质粒免疫组血清中能检测到特异性IBDV抗体和IBDV中和抗体,第28天,该组鸡的抗体滴度极显著高于空白对照组(P<0.01),该组鸡外周血淋巴细胞增殖能力也极显著高于空白对照组(P<0.01)。说明VP2-Akirin2-GM-CSF三基因串联DNA疫苗有很好的应用前景。
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- 关键词：VP2基因
- 禽网状内皮组织增生症病毒的分离鉴定、全基因序列分析及致病性试验被引量：3
- 2014年
- 本试验采集广东某鸡场疑似禽网状内皮组织增生症患病鸡病料并进行处理,经接种DF1细胞、聚合酶链式反应(PCR)及特异性间接免疫荧光试验(IFA),分离鉴定出1株禽网状内皮组织增生症病毒(REV),命名为GD1210。依据已发表的REV前病毒全基因组序列设计并合成6对引物,采用分段扩增的方法完成了分离株的全基因组序列测定。结果显示,该分离株基因组序列全长8443bp。将该分离株的基因序列与国内外各参考株相应序列进行同源性比对分析,与SNV株亲缘关系最近,核苷酸同源性最高。将该分离株感染1日龄SPF鸡以鉴定其致病性,结果显示该分离株使SPF鸡产生严重的免疫抑制作用。
- 王建丽郭凯刘正伟刘郁夫刘传高赵大伟李慧敏董楠陈瑞爱
- 关键词：网状内皮组织增生症病毒
- 一株产角蛋白酶的铜绿假单胞菌的分离鉴定被引量：7
- 2017年
- 本研究从鸡场长期堆放羽毛的土壤中筛选到一株降解羽毛能力强的菌株。该菌株在牛奶平板上培养24h后产生透明降解圈,形状不规则,表面粗糙,边缘模糊,产生绿色荧光色素;革兰氏染色阴性,短杆状,无芽孢,有鞭毛,无荚膜。生化试验显示,该分离株能够水解牛奶、明胶,具有角蛋白酶活性,能利用柠檬酸盐,硝酸还原反应阳性。系统进化树分析显示,分离株与铜绿假单胞菌模式菌株(GenBank登录号:BAMA01000316)亲缘关系最近,综合以上结果,最终确定分离株为铜绿假单胞菌,并正式命名为Pesudomonas aeruginosa B1-2。将该分离株在以1%羽毛为唯一碳氮源的基础培养基中发酵培养,48h后角蛋白酶活性最高达到60.3U/mL,对羽毛降解率为85.7%。本研究中分离获得的Pesudomonas aeruginosa B1-2可用于畜禽废弃物的处理。
- 黄妙容钟楚红任广彩刘传高叶俊贤陈瑞爱
- 关键词：生化试验角蛋白酶铜绿假单胞菌
- 鸡Akirin2基因对传染性法氏囊病病毒VP2 DNA疫苗免疫反应的影响
- 2016年
- 为了探讨鸡Akirin2基因对传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2 DNA疫苗诱导的免疫反应的影响,将同时表达VP2蛋白和Akirin2蛋白的重组质粒免疫14日龄SPF鸡,14 d后加强免疫,最后以IBDV BC6-85强毒攻击。结果显示,Akirin2基因能够增强VP2 DNA疫苗诱导的特异性免疫反应,提高外周血淋巴细胞的增殖能力,影响细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-9、IL-10、IL-17和IL-18的表达水平。与单独免疫表达Akirin2蛋白或VP2蛋白的重组质粒对上述细胞因子表达的影响有一定差异。
- 刘传高钟楚红任广彩朱娇娇赵大伟叶俊贤赵兵温良海陈瑞爱
- 关键词：传染性法氏囊病病毒VP2DNA疫苗免疫反应
