陈勇
- 作品数：5 被引量：16H指数：3
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- TGF-β1对胶质瘤U87细胞上皮-间质转化的诱导作用被引量：6
- 2016年
- 目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)诱导胶质瘤U87细胞发生上皮-间质转化(EMT)的作用,为阐明胶质瘤侵袭性生长的机制提供依据。方法:以不同浓度TGF-β1体外处理胶质瘤U87细胞,分为2.5×10^(-6)、5.0×10^(-6)、10.0×10^(-6)和20.0×10^(-6)g·L^(-1) TGF-β1组,以0×10^(-6)g·L^(-1) TGF-β1组作为空白对照组。Western blotting法检测各组U87细胞中上皮标志物(上皮钙黏蛋白)和间质标志物(神经钙黏蛋白和波形蛋白)以及转录因子(Snail、Slug和Zeb1蛋白)的相对表达水平;倒置显微镜下观察U87细胞形态表现;划痕愈合实验检测U87细胞相对迁移距离。结果:随着TGF-β1浓度的升高,胶质瘤U87细胞中上皮钙黏蛋白相对表达水平逐渐降低,2.5×10^(-6)、5.0×10^(-6)、10.0×10^(-6)和20.0×10^(-6) g·L^(-1) TGF-β1组U87细胞中上皮钙黏蛋白相对表达水平低于空白对照组(P<0.05或P<0.01);神经钙黏蛋白和波形蛋白相对表达水平则随着TGF-β1浓度的升高逐渐升高,神经钙黏蛋白相对表达水平分别比空白对照组升高11.5%(P>0.05)、39.4%(P>0.05)、51.0%(P<0.05)和76.9%(P<0.05);10.0×10^(-6)和20.0×10^(-6)g·L^(-1) TGF-β1组U87细胞中波形蛋白相对表达水平均高于空白对照组(P<0.01)。5.0×10^(-6)、10.0×10^(-6)和20.0×10^(-6) g·L^(-1) TGF-β1组U87细胞中Snail、Slug和Zeb1蛋白的相对表达水平高于空白对照组(P<0.05或P<0.01)。与空白对照组比较,10.0×10^(-6) g·L^(-1) TGF-β1组U87细胞呈拉伸状和更为狭长,细胞迁移能力明显增强。结论:一定浓度范围内,TGF-β1能以浓度依赖方式诱导胶质瘤U87细胞发生EMT。
- 宋扬赵丽艳陈勇吕晓艳崔佳乐李蕴潜赵刚
- 关键词：胶质瘤细胞转化生长因子Β1上皮-间质转化钙黏蛋白
- 沉默ZEB1基因对胶质瘤U87细胞上皮-间质转化的影响被引量：2
- 2019年
- 目的:探讨沉默锌指E盒结合同源框1(ZEB1)基因对胶质瘤U87细胞间质标志物表达和细胞迁移的作用,阐明ZEB1对胶质瘤细胞上皮-间质转化(EMT)的影响。方法:将构建的ZEB1短发夹RNA(shRNA)干扰质粒(shZEB1#1和shZEB1#2)和对照质粒(shCtrl)转染至胶质瘤U87细胞,Westernblotting法检测干扰效果。将胶质瘤U87细胞分为对照组(转染shCtrl的胶质瘤U87细胞)、EMT组[转染shCtrl的胶质瘤U87细胞用转化生长因子β1(TGF-β1)诱导EMT]和ZEB1基因沉默组(转染shZEB1的胶质瘤U87细胞用TGF-β1诱导EMT)。Westernblotting法检测各组细胞中间质标志物(N-钙黏蛋白和波形蛋白)及基质金属蛋白酶9(MMP-9)的蛋白表达水平,划痕愈合实验检测各组细胞的迁移率。结果:Westernblotting法检测,转染shZEB1#1和shZEB1#2的胶质瘤U87细胞中ZEB1蛋白表达水平较转染shCtrl的细胞明显降低(P<0.05或P<0.01),shZEB1#2对ZEB1表达的抑制效果更明显,表明ZEB1已稳定转染到U87细胞。与对照组比较,EMT组胶质瘤U87细胞中N-钙黏蛋白、波形蛋白和MMP-9蛋白表达水平均明显升高(P<0.05或P<0.01);与EMT组比较,ZEB1基因沉默组N-钙黏蛋白、波形蛋白和MMP-9蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。EMT组细胞迁移率明显高于对照组(P<0.01),而ZEB1基因沉默组细胞迁移率明显低于EMT组(P<0.01)。结论:沉默ZEB1基因表达可抑制胶质瘤U87细胞EMT,并降低细胞迁移能力,提示ZEB1可作为侵袭性胶质瘤治疗的重要靶标。
- 赵丽艳宋扬陈勇贾茗博李蕴潜
- 关键词：基因沉默上皮-间质转化细胞迁移
- 替莫唑胺联合二甲双胍对胶质瘤干细胞的清除作用及其机制被引量：5
- 2015年
- 目的:探讨替莫唑胺(TMZ)联合二甲双胍(MET)对体外胶质瘤干细胞(GSCs)的清除作用,探讨其作用机制。方法:神经干细胞培养基培养人胶质瘤U87细胞,免疫荧光法鉴定GSCs。收集GSCs,以对照液、不同浓度TMZ、MET和TMZ+MET作用细胞,分为对照组、TMZ组、MET组和TMZ+MET组。显微镜下计数各组二次神经球的数量;CCK-8法检测各组GSCs增殖抑制率;流式细胞术和Annexin-PI双染流式细胞术检测GSCs各细胞周期百分比和凋亡率。结果:与对照组比较,TMZ+MET组二次神经球数量以浓度依赖的方式减少;与TMZ和MET组比较,TMZ+EMT组二次神经球数量明显减少(P<0.01)。与对照组比较,TMZ和MET组GSCs增殖抑制率升高;TMZ+MET组GSCs增殖抑制率高于TMZ或MET组,联合指数(CI)小于1。流式细胞术,与TMZ和MET组比较,TMZ+MET组G2/M期GSCs百分比明显升高(P<0.05);TMZ+MET组GSCs凋亡率明显高于TMZ和MET组(P<0.05)。结论:TMZ联合MET在体外能抑制GSCs的连续自我更新能力并清除GSCs,其机制可能与阻滞GSCs细胞周期进展和诱导细胞凋亡有关联。
- 余志云李蕴潜陈勇赵丽艳刘焕兵王楠王斌陈云照赵刚
- 关键词：替莫唑胺二甲双胍胶质瘤干细胞自我更新
- 白藜芦醇对胶质瘤U87细胞上皮-间质转化的抑制作用被引量：3
- 2018年
- 目的:探讨白藜芦醇(Res)对胶质瘤U87细胞上皮-间质转化(EMT)、迁移和侵袭能力的调控作用,阐明Res对胶质瘤细胞EMT的抑制作用。方法:将胶质瘤U87细胞分为对照组(不做处理)、EMT组(TGF-β1诱导EMT)和Res处理组(Res处理EMT)。应用Western blotting法检测各组细胞中间质标志物(N-钙黏蛋白、β-连环蛋白和波形蛋白)、诱导EMT的转录因子(Snail、Slug和Twist1)以及基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的蛋白表达水平。划痕愈合实验检测细胞迁移能力,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果:与对照组比较,EMT组胶质瘤U87细胞的间质标志物(N-钙黏蛋白、β-连环蛋白和波形蛋白)、诱导EMT的转录因子(Snail、Slug和Twist1)和MMP-2、MMP-9蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);与EMT组比较,Res处理组上述蛋白表达水平明显下调(P<0.05和P<0.01);40μmol·L^(-1) Res处理组效果较20μmol·L^(-1) Res处理组更明显(P<0.05)。EMT组细胞迁移率和侵袭率明显高于对照组(P<0.01),而Res处理组胶质瘤细胞迁移率和侵袭率明显低于EMT组(P<0.01)。结论:Res能抑制胶质瘤U87细胞EMT,降低细胞的迁移和侵袭能力。
- 赵丽艳宋扬陈勇吕晓艳贾茗博李蕴潜
- 关键词：白藜芦醇胶质瘤U87细胞上皮-间质转化细胞迁移细胞侵袭
- 胶质瘤细胞上皮-间质转化及靶向抑制策略的研究进展被引量：4
- 2017年
- 上皮-间质转化(EMT)在促进肿瘤的侵袭、转移、复发和治疗抵抗中起重要作用。胶质瘤细胞能够发生EMT,但有一定特殊性。EMT与胶质瘤干细胞(GSCs)之间有密切联系,EMT能使胶质瘤细胞获得干细胞特性。EMT、CSCs和耐药构成肿瘤致命性"三组合"。靶向干预EMT可能阻止肿瘤细胞侵袭和转移、清除CSCs并克服耐药性,已成为备受重视的胶质瘤治疗新策略。本文重点介绍胶质瘤细胞发生EMT的证据和特殊性、EMT与GSCs之间的关系以及靶向抑制EMT的策略,为治疗脑胶质瘤提供了新的思路。
- 宋扬赵丽艳李蕴潜陈勇
- 关键词：胶质瘤细胞上皮-间质转化肿瘤干细胞胶质瘤干细胞
