刘悦
- 作品数:2 被引量:2H指数:1
- 供职机构:海南大学环境与植物保护学院更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 表达hpa1_(Xoo)基因棉花对黄萎病抗性及农艺性状的影响被引量:1
- 2015年
- 黄萎病是棉花生产中最具毁灭性病害之一,种植抗病品种是控制黄萎病害最为有效途径之一。本试验通过花粉管通道法将hpa1Xoo基因导入陆地棉品系854,经多代选育获得了可稳定遗传表达hpa1Xoo基因且农艺性状稳定的2个棉花材料854-3、854-5,具有出苗快、长势较好、整齐度高、植株中等、株型松、茎秆毛少光滑、叶片大、叶色深绿、叶功能较好、结铃性较强、铃形较大、吐絮畅等特点。2013—2014年854-3、854-5株高98.0~114.0 cm,单株果枝15.60~18.10个,单株结铃26.90~48.45个,铃质量5.26~5.92 g,衣分39.54%~45.10%,籽棉产量3 186.45~5 023.65 kg/hm^2,皮棉产量1 437.5~1 998.45 kg/hm^2。854-3、854-5黄萎病指数分别为4.23、2.80,均为高抗水平。854-3、854-5纤维上半部平均长度分别为28.78、28.83 mm,断裂比强度分别为27.9、28.4 c N/tex,马克隆值分别为5.67、5.83,伸长率分别为6.3%、6.2%。854-3、854-5纤维外观色泽洁白,手感有弹性,内在品质优良,可为棉花抗病品种选育提供种质或材料。
- 刘悦金中时王凤良宋从凤王金生龚伟荣周翔缪卫国
- 关键词:转基因棉花抗黄萎病农艺性状
- 棉花角斑病菌hpaXm基因突变体与互补载体构建被引量:1
- 2014年
- 为了分析研究Harpin蛋白转运途径,针对来自棉花角斑病菌的HpaXm,构建hpaXm基因突变体和互补载体,根据文献和GenBank中已登录的hpaXm基因全序列及其同源基因hpa1的序列,设计合成多对引物进行PCR扩增,并将扩增片段与载体相连接,用电转化的方式将构建成功的hpaXm基因敲除载体转化Xanthmonas citri subsp.malvacearum,然后测定hpaXm基因突变体在烟草上激发HR的能力。结果得到hpaXm基因上游序列349 bp,hpaXm基因下游序列465 bp;利用重叠PCR将hpaXm基因上下游序列融合,克隆到自杀载体pK18mob的酶切位点BamHI和EcoRI之间,并将pK18mobhpaXm上下游融合片段转化大肠杆菌E.coli DH5α,经卡那霉素平板筛选得到阳性转化子;将hpaXm基因敲除载体转化X.citri subsp.malvacearum,经PCR验证成功敲除hpaXm基因,并发现hpaXm基因突变体在烟草上激发HR的能力要弱于野生型菌株。扩增得到hpaXm基因片段402 bp和信号肽类似序列缺失hpaXm46-402基因片段360 bp,克隆到广宿主载体pHM1的KpnI和SacI酶切位点之间,并将pHM1hpaXm和pHM1hpaXm46-402转化E.coli DH5α,经壮观霉素平板筛选得到阳性转化子。重组质粒经PCR检测、测序鉴定及突变体在烟草上的表型验证,表明hpaXm基因突变体和互补载体构建成功,为hpaXm基因回复突变株的构建和进一步研究信号肽序列缺失对HpaXm蛋白转运的影响奠定了基础。
- 王慕瑾刘悦孙超缪卫国郑服丛
- 关键词:突变体