杨柳
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：西北农林科技大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 猪笼草中产蛋白酶内生菌的分离及鉴定被引量：1
- 2012年
- 采用研磨法分离纯化猪笼草各组织器官中的内生菌,并采用水解圈法和摇瓶发酵法分别进行初筛与复筛,对筛选出的菌株进行16SrDNA分析鉴定。结果表明:在猪笼草叶片、捕虫囊、根和茎等4种器官中共分离出25株内生菌;进一步从中筛选出2株可产胞外蛋白酶的细菌A3、L5,其中菌株A3的产酶能力较高,水解圈/菌落直径比(D/d)值为6.5,发酵液的蛋白酶活力为17.58U/mL;菌株L5的D/d值为3.0,发酵液的蛋白酶活力为15.77U/mL;16SrDNA鉴定结果表明,菌株A3、L5与芽孢杆菌属成员具有99%的同源性,其中A3是枯草芽孢杆菌(Ba-cillus subtilis),L5可能是其的新变种或新亚种。
- 李文鹏李绍军李军超叶国超朱玲芳王晓鑫安卫星杨柳刘洋
- 关键词：猪笼草内生菌菌种鉴定蛋白酶
- 水稻CRISPRa系统的优化及验证
- 2023年
- CRISPR激活(CRISPR activation,CRISPRa)是通过dCas9-sgRNA复合体融合或招募转录激活域至启动子区以增强基因转录的CRISPR衍生技术。为提高水稻CRISPRa系统特异性及其激活效率,设计点突变引物将dCas9突变为特异性更强的HFdCas9,同时采用2×35S启动子表达密码子优化的水稻HFdCas9-TV。通过将HFdCas9-TV质粒和sgRNA质粒共转染水稻原生质体,基于OsGW7和OsF3H的相对表达量变化检测所构建的CRISPRa系统激活效率。结果表明,该系统可激活OsGW7至对照组的95倍,为CCTV系统的2.2倍;可同时激活OsGW7、OsF3H表达量分别至对照组的33倍和26倍。该系统的建立为开发特异性更强、效率更高的植物CRISPRa系统奠定前期试验基础,为水稻及其他作物分子育种提供“多重加法”的技术方案。
- 杨柳姚毅菲刘林丽苏颜琦刘华伟
- 关键词：基因激活水稻原生质体
