王建民
- 作品数：2 被引量：11H指数：2
- 供职机构：吉林省中西医结合医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 整合素α_Vβ_3在细胞外基质调控人黑色素瘤MMP-2表达和活化中的作用被引量：3
- 2006年
- 目的:探讨整合素αVβ3在细胞外基质调控人黑色素瘤细胞基质金属蛋白酶2(matrixmetalloproteinase-2,MMP-2)表达和活化中的作用和地位。方法:选择黑色素瘤细胞系M21及突变型M21-L(M21-L不表达整合素αVβ3),通过观察2个细胞系在同一试验条件下的差异,研究整合素αVβ3在黑色素瘤细胞系M21与M21-L及其在MMP-2表达和活化中的作用;应用酶谱分析法检测黑色素瘤细胞系M21与M21-L,在包被I型胶原(type I collagen,Icol)、纤维黏连蛋白(fibronectin,FN)及ECM胶3种细胞外基质成分后,黑色素瘤细胞系M21与M21-L两者MMP?2表达量及活性的变化;通过RT-PCR方法检测包被后黑色素瘤细胞系M21与M21-L两者MT1-MMP mRNA表达水平的变化;通过Boyden小室膜侵袭实验观察黑色素瘤细胞系M21和M21-L细胞侵袭性差异。结果:培养于三维聚合Ⅰ型胶原、纤维黏连蛋白及ECM胶的M21细胞酶谱分析结果中出现了62 000的MMP-2的活化带,其膜型基质金属蛋白酶1(membrane?typematrixmetalloproteinase-1,MT1-MMP)mRNA表达均较没有包被3种细胞外基质的空白对照组增高;而M21-L在包被细胞外基质成分前后未出现MMP-2的活化,其MT1-MMP mRNA表达水平变化无统计学意义;Boyden小室检测表明,M21细胞侵袭力明显高于M21-L细胞。结论:整合素αVβ3参与了人黑色素瘤细胞M21的MMP-2表达和活化过程,是细胞外基质成分调控黑色素瘤细胞MMP-2表达和活化的必要条件。
- 梅红郭玉芳郑贤红王心蕊张丽红朱桂彬王建民李一雷
- 关键词：明胶酶A
- 人骨髓间充质干细胞与成骨细胞共培养诱导破骨细胞方法的建立和鉴定被引量：8
- 2007年
- 目的:建立人骨髓间充质干细胞(hMSCs)与人成骨细胞共培养体系,为人破骨细胞体外培养提供更完善的方法。方法:采用酶消化法分离流产胎儿头盖骨,获取人成骨细胞,对在体外培养的成骨细胞进行碱性磷酸酶染色(ALP染色);利用Percoll梯度分离法和贴壁筛选法培养hMSCs,应用流式细胞术检测hMSCs免疫学表型,对其进行鉴定;将获得的成骨细胞和hMSCs在体外共培养作为实验组,单独培养的成骨细胞作为对照组;对诱导后的细胞应用抗酒石酸酸性磷酸酶染色(TRAP)进行鉴定。结果:体外分离、培养的hMSCs具有独特的细胞免疫学表型,即CD73和CD105阳性,CD34和CD45阴性。hMSCs与成骨细胞共同培养5d后,即可见单个核细胞融合成多核细胞,TRAP染色可见多数细胞胞浆呈酒红色,为诱导成功的破骨细胞。结论:hMSCs与人成骨细胞共同培养能诱导为具有典型的破骨细胞表型的多核细胞。
- 梅红李一雷王心蕊张丽红刘巍王建民李玉林
- 关键词：破骨细胞骨髓间充质干细胞成骨细胞
