张娜
- 作品数：2 被引量：17H指数：1
- 供职机构：河北省科学院更多>>
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- 相关领域：轻工技术与工程农业科学更多>>
- 呋喃唑酮代谢物单克隆抗体和胶体金免疫层析试纸条的研制被引量：17
- 2017年
- 本研究旨在建立一种快速检测呋喃唑酮代谢物残留的方法。试验用呋喃唑酮代谢物的衍生物(CPAOZ)与牛血清白蛋白(BSA)的偶联物免疫小鼠,利用单克隆抗体技术制备杂交瘤细胞,用间接ELISA和间接竞争ELISA法对阳性克隆进行筛选。单克隆细胞株诱生腹水后,经纯化即为单克隆抗体,用于胶体金标记,制备呋喃唑酮代谢物胶体金免疫层析试纸条。融合后得到2株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株,其中4G3纯化后的抗体效价达到1:100万,对CPAOZ的50%抑制质量浓度(IC50)为1.7μg/L,亲和常数Ka=1.6×109 L/mol。该抗体制备的胶体金试纸条的检测限为4μg/L,与其他3种硝基呋喃代谢物的衍生物CPAHD、CPSEM和CPAMOZ均不存在交叉反应,对样品的检测与高效液相色谱结果一致。本研究制备了抗呋喃唑酮代谢物特异性单克隆抗体,并研制了以单抗为基础的胶体金免疫层析试纸条,能够实现呋喃唑酮代谢物残留的快速、灵敏的检测。
- 李春生刘静静杜顺丰武孝丽曹秀梅吴萌张娜
- 关键词：单克隆抗体胶体金免疫层析试纸条
- 赭曲霉毒素A人工抗原合成及多克隆抗体的制备
- 2015年
- 试验采用活性酯法将赭曲霉毒素A(OTA)分别与BSA、KLH偶联,合成人工免疫抗原OTA-BSA和人工检测抗原OTA-KLH,并通过紫外光谱扫描(UV)、SDS-PAGE验证偶联成功,OTA-BSA的偶联比为12.5∶1,OTA-KLH的偶联比为10∶1。用OTA-BSA免疫BALB/c小鼠,获得高效价、高特异的小鼠多抗血清,多抗血清效价达1∶2×105以上,在0.1 ng/m L^8.1 ng/m L的范围内,线性关系良好,R2=0.996 1,IC50为0.18 ng/m L。鼠多抗血清除与赭曲霉毒素B有18%的交叉反应率外,与玉米赤霉烯酮、黄曲霉毒素B 1、脱氧雪腐镰刀菌烯醇等类似物的交叉反应率(CR)均小于0.2%,特异性良好。
- 吴萌李君华李春生齐颖颖程华闫静辉张娜
- 关键词：赭曲霉毒素A人工抗原ELISA
