潘成奇
- 作品数：3 被引量：7H指数：1
- 供职机构：福州大学生物科学与工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金福建省教育厅资助项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 庆大霉素生物合成基因genN的研究
- 2015年
- 利用生物信息学方法分析庆大霉素生物合成特色基因gen N的功能,构建gen N缺失的基因工程菌。首先运用分子生物学技术构建同源重组质粒p FU604,其次重组质粒经接合转移导入绛红色小单孢菌M.purpurea GK1101。最后,基于同源重组机制,利用安普霉素抗性筛选及PCR鉴定,得到gen N基因缺失的工程菌(M.purpurea GKN-27)。结果显示:较岀发菌GK1101,基因工程菌GKN-27不再继续合成庆大霉素C1a和C2b,阻断庆大霉素生物合成代谢流,并积累分子量为497、524、523、503四种新的中间代谢物,新的中间代谢物将有望开发新型药物。同时,也表明gen N不是C-6'N甲基化酶编码基因。
- 张熠洪文荣潘成奇
- 关键词：庆大霉素基因敲除工程菌构建生物信息学
- 绛红色小单孢菌基因文库的构建及庆大霉素生物合成基因簇的筛选
- 载体Supercos-1经Nhe I和BamH I消化并去磷酸化,得到的载体片段与经Sau3A I部分消化的绛红色小单孢菌染色体DNA连接。利用噬菌体包装蛋白连接产物并侵染E.coli LE392获得绛红色小单孢菌基因文...
- 潘成奇洪文荣
- 关键词：基因文库基因筛选
- 金色链霉菌接合转移体系的构建被引量：7
- 2011年
- 以金色链霉菌J13基因组DNA为模板,扩增金霉素C6甲基化酶基因ctcF上下游序列作为两端同源交换臂,在两臂之间添加抗性筛选标记neo基因,并在该基因上游加入组成型强启动子ermE*,以强化筛选标记.将该外源DNA序列插入到质粒pSET152,构建重组质粒pFD106.转化大肠杆菌ET12567后,经接合转移导入金色链霉菌J13中,MS平板上筛选阳性接合子.PCR检测表明,重组质粒已整合到染色体DNA上.
- 方志锴洪文荣严凌斌潘成奇朱宝泉
- 关键词：金色链霉菌
