张战军
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
- 供职机构：洛阳市妇女儿童医疗保健中心更多>>
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- 肺炎衣原体Cpn0147基因的克隆、表达与定位及其重组蛋白的生物信息学分析被引量：3
- 2009年
- 目的重组表达肺炎衣原体Cpn0147基因,并对表达的内源性蛋白进行细胞内定位,对重组蛋白进行生物信息学分析。方法使用PCR方法从肺炎衣原体菌株AR39基因组中扩增第0147段开放读码区基因,使用限制性内切酶BamHⅠ和NotⅠ酶切目的片段和载体PGEX-6P2,T4连接酶连接后转化入大肠埃希菌感受态XL-Blue,并诱导表达融合蛋白GST-Cpn0147。用融合蛋白免疫小鼠,制备抗体,应用IFA方法对衣原体感染细胞内Cpn0147基因表达的内源性蛋白进行定位。利用软件Expasy对重组蛋白进行生物信息学分析。结果克隆出肺炎衣原体基因Cpn0147,全长450 bp,编码蛋白分子质量单位为14.727 ku,表达的融合蛋白GST-Cpn0147分子质量单位约为43 ku;用制备的抗体做IFA,显示现该蛋白定位于肺炎衣原体包涵体膜上。生物信息学分析该蛋白含2个抗原决定簇,具有良好的抗原性和亲水性。结论肺炎衣原体Cpn0147基因编码蛋白为一包涵体膜蛋白,抗原性和亲水性较好。
- 童伟张战军贾天军
- 关键词：肺炎衣原体克隆生物信息学分析
