王月皎
- 作品数:5 被引量:6H指数:1
- 供职机构:南京林业大学更多>>
- 发文基金:引进国际先进农业科技计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程医药卫生化学工程更多>>
- 一种基于纤维小体的毕赤酵母表面共展示系统及其构建方法和应用
- 本发明提供了一种基于纤维小体的毕赤酵母表面共展示系统及其构建方法和应用,属于分子生物学、食品以及基因工程技术领域。本发明所述系统包括锚定蛋白和多蛋白展示底架蛋白,所述锚定蛋白为酿酒酵母细胞壁蛋白Sed1p;所述多蛋白展示...
- 李迅王亮亮王月皎李文谦王飞张瑜
- 文献传递
- 利用丝瓜络固定全细胞生物催化剂制备生物柴油
- 微生物脂肪酶是一类广泛应用生物柴油领域的生物催化剂,但其高成本限制了它的应用。为了克服生物酶的不足之处问题,本研究利用载体固定微生物细胞制备成全细胞催化剂,该全细胞催化剂制作工艺简单,可多次回收利用,大大降低了生物催化剂...
- 何琦阳王月皎李迅张瑜王飞
- 关键词:生物柴油甲酯化华根霉
- 来自嗜热细菌Caldicellulosiruptorsaccharolyticus的新型GH10木聚糖酶分离纯化及其酶学性质研究
- 嗜热酶是极端酶的一种,作为生物催化剂有许多优势。由于嗜热酶的催化反应在高温下进行,杂菌及其代谢产物的污染可以减少,从而提高产物的纯度。
- 王月皎李蕾王飞张瑜李迅
- 关键词:嗜热菌木聚糖酶低聚木糖
- 嗜热木聚糖酶的克隆表达及其在酶解生产低聚木糖中的应用被引量:1
- 2018年
- 目的:为了获得一种耐高温的木聚糖酶,并对其生物特性进行表征,使其能够更有效地应用于低聚木糖的制备。方法:首先通过生物信息学分析,确定来自厌氧孢子菌Caldicellulosiruptor saccharolyticus DSM 8903的木聚糖酶(Cs Xyn B)基因序列,然后扩增Cs Xyn B基因,以p ET-20b为载体,构建重组质粒,将其转入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中表达,重组酶通过热处理和镍柱亲和层析纯化获得纯酶,将纯酶用于后续酶学性质和降解木聚糖的研究。结果:通过生物信息学方法研究表明,Cs Xyn B属于糖苷水解酶第10家族。Cs Xyn B的最适反应温度为80℃,最适反应p H为6.5。在65℃以内,p H为5.5~7.5的条件下重组木聚糖酶的稳定性较高。以榉木木聚糖为底物时,Cs Xyn B的K_m,V_(max)和K_(cat)值分别为1.8 mg/m L,46.0 U/mg和60.7 s^(-1)。在65℃、p H6.5条件下,以榉木木聚糖为底物,木聚糖酶Cs Xyn B反应1 h,生成的低聚木糖的主要成分为木二糖和木三糖。结论:Cs Xyn B是一种极具特点的耐高温木聚糖酶,可以催化水解木聚糖生成高含量的木二糖和木三糖,在生产低聚木糖的应用中具有潜在价值。
- 王月皎何浪王飞张瑜李迅
- 关键词:嗜热菌木聚糖酶低聚木糖大肠杆菌
- 解糖热纤维菌木糖苷酶的分离纯化及其酶学性质被引量:5
- 2017年
- 通过生物信息学分析,确定厌氧孢子菌Caldicellulosiruptor saccharolyticus编码的木糖苷酶(XYL39B)属于糖苷水解酶第2家族,是极端耐热的水解低聚木糖为木糖的关键酶。将XYL39B基因(xyl39B)导入大肠杆菌BL21(DE3)中表达,通过热处理和镍柱亲和层析获得纯酶。对纯化的重组XYL39B进行酶学性质的表征,结果表明该酶的最适反应温度为70℃,最适反应p H为6.0。在p H 6.0,70℃条件下保温2h后残留相对酶活仍达90%以上,在55~75℃范围内酶活较高且比较稳定。Zn2+、Cu2+、SDS对酶活力的抑制作用较明显,其他金属离子和化学试剂对该酶的酶活力影响不显著。在以4-对硝基苯酚-β-D-木糖苷(p NPX)为底物,该酶的表观活化能为14.52k J/mol,其Km值为11.47mmol/L,Vmax为29.4U/g,Kcat为20.60s–1,木糖对其反馈抑制较弱(抑制常数Ki为306.87mmol/L),综上结果显示该酶是活性较高且抑耐木糖抑制的细菌源极端耐热木糖苷酶。研究结果为其后续的基因改造和实际应用奠定理论基础。
- 王月皎夏乾竣周佩张瑜王飞李迅
- 关键词:Β-木糖苷酶酶学性质