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陈亚娜: 作品数：21 被引量：116H指数：7; 供职机构：中国动物疫病预防控制中心更多>>; 发文基金：国家科技基础性工作专项国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生更多>>

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猪圆环病毒1型微滴数字PCR定量检测方法的建立被引量：14: 2017年; 以猪圆环病毒1型ORF1基因为靶基因,建立了可对其准确定量的微滴数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)方法。对ddPCR反应中的探针浓度进行了优化。结果显示:ddPCR反应中的最佳探针浓度为250nmol/L;ddPCR方法线性相关系数(R2)为0.999,呈良好的线性关系;检测限为7.8copies/20μL;变异系数为2.7%;与其他病毒无交叉反应。通过对临床样品的检测,检测结果与实时荧光PCR结果一致。结果表明:新建立的ddPCR方法敏感性高、特异性强,可用于猪圆环病毒1型的定量检测。; 原霖訾占超亢文华李晓霞汪葆玥王静韩焘陈亚娜倪建强翟新验

3种国产布病抗体检测试剂盒的效果评价被引量：9: 2020年; 为了比较国产布鲁菌病间接ELISA抗体检测试剂盒、竞争ELISA抗体检测试剂盒和胶体金试纸条的检测效果,通过对已知阴阳性血清样品的检测,比较了上述3种检测方法的敏感性和特异性。进一步采用临床血清样品比较了3种检测方法与虎红平板凝集试验(RBT)的检测效果,并采用补体结合试验(CFT)对结果进行了复核。结果显示,间接ELISA、竞争ELISA和胶体金试纸条的敏感性分别为96.67%,100.00%和98.33%,3种检测方法的特异性分别为98.33%,93.33%和93.33%。对300份临床样品的检测结果显示,4种检测方法共同检出的阳性样本为27份,阴性样品为210份,整体符合率为79%。通过CFT对63份不同方法检验结果有差异的样本进行确诊,结果表明RBT与CFT的符合率最低,仅为3.17%;间接ELISA与CFT的符合率最高,为98.41%;竞争ELISA和胶体金试纸条的符合率分别为87.30%,85.71%。结果表明,间接ELISA、竞争ELISA和胶体金试纸条具有良好的特异性和敏感性,能够满足布病临床检测需求;RBT对临床样本的检测存在较高比例假阳性和假阴性。; 董浩韩焘徐琦吴方达刘林青陈亚娜原霖宋晓晖王传彬; 关键词：布鲁菌病间接ELISA 竞争ELISA 胶体金试纸条

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒国家核酸标准物质的研制被引量：8: 2019年; 为了研制高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)国家核酸标准物质,将PRRSV美洲变异株代表毒株PRRSV JXA1接种Marc145细胞,出现细胞病变后,反复冻融并收集病毒液,并灭活分装。制备后进行均匀性、稳定性评估、数字PCR法定值、不确定度分析和临床试用。结果表明,制备的标准物质的定值为:(1.13±0.18)×10~4拷贝/μL,样品均匀;-20℃可稳定保存12个月以上、4℃可稳定2个月以上。经全国标准物质管理委员会的专家评审,该制备物达到了国家二级标准物质要求,可以作为核酸扩增检测PRRVS的核酸标准物质。; 原霖李尔华董浩陈亚娜鞠厚斌张红丽王林宋晓晖杨林王传彬; 关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征核酸扩增标准物质

伪狂犬病病毒微滴数字PCR定量检测方法的建立被引量：23: 2017年; 为了建立伪狂犬病病毒(PRV)微滴数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)的检测方法,以伪狂犬病病毒gB基因为靶基因,建立了可对其准确定量的微滴数字PCR方法。对ddPCR反应中的引物浓度、探针浓度、退火温度进行了优化。对建立的ddPCR方法的特异性和敏感性也进行测定,并且应用于临床样品的检测。结果表明,ddPCR的最佳引物浓度为0.9μmol·L^(-1),探针浓度为0.25μmol·L^(-1),退火温度为60℃。ddPCR方法线性相关系数(R2)为0.998,显示呈良好的线性关系。检测限为6.1copies·μL^(-1),比荧光定量PCR(Real Time PCR,qPCR)的检测限低,变异系数为2.81%,与其他病毒无交叉反应。通过对临床样品的检测,与病毒分离比较,ddPCR方法的敏感性为87.5%,特异性为96.2%,符合率为97%。结果表明新建立的ddPCR方法,敏感性高、特异性强,可用于伪狂犬病病毒的定量检测。; 陈亚娜王静訾占超亢文华汪葆玥倪建强原霖; 关键词：伪狂犬病病毒

鉴别布鲁菌A19疫苗株的双重荧光定量PCR方法的建立与应用被引量：1: 2022年; 为建立一种可以鉴别布鲁菌A19疫苗株和其他布鲁菌的双重荧光定量PCR方法,分别设计特异性扩增布鲁菌BCSP31基因序列和A19疫苗株缺失序列的2套引物探针,对引物和探针浓度进行优化,并对其敏感性、特异性和重复性进行评价。结果表明,用该方法对2种阳性质粒标准品的最低检测限均为10拷贝/μL;该方法扩增A19疫苗株的核酸时只呈现出1条特异性的扩增曲线,扩增其他布鲁菌菌株(包括疫苗株与野毒株)的核酸时,会出现2条特异性的扩增曲线,而非布鲁菌的细菌核酸均未出现特异性的扩增曲线。该方法的批内和批间重复变异系数均小于3%,重复性良好。对122份临床样品的检测结果显示该方法的阳性样品检出率高于套式PCR检测方法和Bruce-Ladder PCR方法,并可对A19疫苗株的核酸进行鉴别。本研究建立的鉴别布鲁菌A19疫苗株的双重荧光定量PCR方法特异性好、灵敏度高、重复性好,可作为临床上进行A19疫苗株鉴别的一种检测方法。; 董浩董浩原霖刘洋陈亚娜陈亚娜梁春南; 关键词：布鲁菌荧光定量PCR

猪圆环病毒Ⅰ型TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立被引量：2: 2017年; 为了建立一种用于检测猪圆环病毒Ⅰ型(PCV-1)的Taq Man荧光定量PCR检测方法,试验以PCV-1 ORF1为靶基因,以PCV-1全基因质粒为标准品,同时还对该方法进行了特异性、敏感性、重复性试验以及临床样品检测。结果表明:该方法检测灵敏度可达5.12拷贝/μL,比常规PCR方法高10倍;线性相关系数(R2)为0.997,扩增效率为104.92%,显示出良好的线性关系和扩增效率;重复性试验的变异系数小于2%,与其他病毒无交叉反应;临床样品检测显示,该方法的检测灵敏度高于普通PCR。说明新建立的方法敏感性高、特异性强,可用于PCV-1检测。; 原霖陈亚娜翟新验; 关键词：TAQMAN探针荧光定量PCR

猪繁殖与呼吸综合征病毒美洲经典株国家核酸标准物质的研制被引量：5: 2018年; 为了研制猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）美洲经典株国家核酸标准物质,将美洲经典株代表PRRSV VR2332接种Marc145细胞,出现细胞病变后,反复冻融并收集病毒液,并灭活分装。制备后进行均匀性评估、稳定性评估、数字PCR法定值和临床试用。结果表明制备的标准物质的定值为（2. 06±0. 31）×104copies/μL;样品均匀;-20℃稳定保存12个月以上、4℃稳定2个月以上。经全国标准物质管理委员会评审,该制备物达到了国家二级标准物质的要求,可以作为核酸扩增检测的PRRSV美洲经典株核酸标准物质。; 原霖高旭年董浩陈亚娜闫若潜兰德松宋晓晖吴佳俊杨林王传彬; 关键词：核酸扩增标准物质

伪狂犬病毒gB、gE双重微滴数字PCR绝对定量检测试剂盒: 本发明公开了一种伪狂犬病毒微滴数字PCR绝对定量检测试剂盒。本发明提供的引物探针组合由gB‑F1R1P1和gE‑F1R1P1组成；引物gB‑F1为序列1所示；引物gB‑R1为序列2所示；探针为序列3所示；引物gE‑F1为...; 原霖杨林王传彬宋晓晖亢文华吴佳俊倪建强周智韩焘訾占超王晓英毕一鸣王静汪葆玥陈亚娜; 文献传递

我国部分地区原种猪场3种猪腹泻病毒的血清学调查被引量：11: 2018年; 为了解猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪轮状病毒（PoRV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）在我国原种猪场的流行情况，采用ELISA检测方法对2016年1—6月采集的896份发病种猪血清样品进行了血清学检测。结果显示，PEDV、PoRV、TGEV抗体阳性率分别为62．3％，89．0％，23．0％，且存在混合感染情况，其中PEDV＋PoRV、PEDV＋TGEV、PoRV＋TGEV混合感染率分别为42．3％，8．5％，5．6％，PEDV＋PoRV＋TGEV混合感染率为8．9％；同时对检测样品进行了不同种猪类别的比较和不同日龄段的比较，发现不同类别种猪抗体阳性率和不同目龄种猪抗体阳性率的分布特征显著。结果说明我国原种猪场3种腹泻病毒中PoRV感染率最高，其次是PEDV和TGEV，且在不同种猪类别和不同日龄段的种猪中呈现规律性分布。本试验对国内原种猪场猪血清进行PEDV、PoRV和TGEV抗体阳性率检测，为我国种猪病毒性腹泻的防控提供了参考。; 王婧怡申之义原霖倪建强张瑜陈亚娜李文杰; 关键词：种猪猪轮状病毒猪传染性胃肠炎病毒血清学检测

猪圆环病毒1型和2型核酸定性标准样品的研制被引量：1: 2021年; 为了研制猪圆环病毒1型(PCV1)、猪圆环病毒2型(PCV2)核酸定性标准样品,分别将PCV1和PCV2病毒全序列克隆至pMD18-T载体中并进行稀释分装。制备后进行均匀性评估、稳定性评估、定值和临床试用。结果:制备的标准样品的参考值分别为:1.33×10^(4) copies/μL(PCV1)和1.11×10^(4) copies/μL(PCV2);样品均匀;-20℃可稳定保存24个月以上,4℃可稳定2个月以上。经国家标准化管理委员会组织的专家评审,达到了国家标准样品的要求,可作为核酸扩增检测的猪圆环病毒核酸标准样品。; 董浩原霖毕一鸣刘洋刘颖映刘玉良陈亚娜顾小雪王传彬; 关键词：猪圆环病毒核酸扩增

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