吕波
- 作品数:2 被引量:2H指数:1
- 供职机构:天津大学药物科学与技术学院更多>>
- 相关领域:理学化学工程更多>>
- 磁性微球用于蛋白-抑制剂复合物解离常数的快速测定被引量:2
- 2013年
- 以凝血酶与其选择特异性抑制剂阿加曲班为模型,应用磁性微球(MM)建立了一种快速测定蛋白-抑制剂复合物解离常数(Kd)的方法。该方法以四氧化三铁磁性微球为载体,在EDC/NHS偶联作用下制备了凝血酶包覆的磁性微球(Thrombin-MM),考马斯亮蓝G-250蛋白定量法间接测定蛋白键合量为4.1 mg/g,取5 mg Thrombin-MM与400μL一系列不同浓度的阿加曲班溶液混合振荡,应用高效液相色谱法通过测定平衡吸附前后药物浓度,代入Scat-chard模型,即得Kd值,与蛋白质数据库中值一致。吸附药物后的Thrombin-MM用含10%甲醇的PBS缓冲液洗脱,回收率约84%,Thrombin-MM可重复利用。
- 王秋玲潘晓霞吕波
- 关键词:磁性微球解离常数凝血酶阿加曲班
- 基于牛血清白蛋白偶联微球的蛋白-药物结合常数快速测定方法研究
- 2014年
- 以氨基化多孔微粒为固相介质,牛血清白蛋白(BSA)为模型蛋白,通过戊二醛交联反应,制备牛血清白蛋白偶联微球,与药物结合,通过离心沉降微球,高效液相色谱法测定上清液中药物浓度的变化,并代入Rosenthal模型,研发出一种新型方法用于药物蛋白结合常数(Ka)的快速测定。利用该方法测定了瑞替加滨与BSA的结合常数,并与传统荧光光谱法对比,两种方法结果一致。键合蛋白微球经PBS缓冲液充分洗脱后,可重复利用。
- 吕波贾桂颖
- 关键词:牛血清白蛋白微球荧光滴定