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柳欣
作品数:
2
被引量:5
H指数:2
供职机构:
华中科技大学生命科学与技术学院
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发文基金:
国家自然科学基金
湖北省杰出青年人才基金
国家高技术研究发展计划
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
蒋明
华中科技大学生命科学与技术学院
刘剑峰
华中科技大学生命科学与技术学院
刘长林
华中科技大学
谢少凡
华中科技大学
陆婕
华中科技大学生命科学与技术学院...
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年份
1篇
2007
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人同种异体移植炎症因子-1的基因克隆及其在小鼠成纤维细胞中的表达
被引量:2
2007年
目的构建人同种异体移植炎症因子-1(allograft inflammatory factor-1,AIF-1)基因的真核表达载体并在小鼠成纤维细胞系(NIH3T3)中表达,为进一步研究AIF-1蛋白的功能奠定基础。方法利用基因重组技术,构建带有AIF-1基因的2种重组真核表达载体:pcDNA3.1(-)/AIF-1与pEGFP-C1/AIF-1。利用脂质体法将2种重组质粒分别转染NIH3T3细胞,用荧光倒置显微镜及Western blot方法观察及鉴定AIF-1在细胞中的稳定表达及瞬时表达。结果酶切分析及DNA序列测定证实,AIF-1基因片段被分别克隆入真核表达载体pcDNA3.1(-)与pEGFP-C1。荧光显微镜观察到NIH3T3细胞中有绿色荧光分布。Western blot结果表明,转染重组质粒的NIH3T3细胞中,AIF-1表达量明显增高。结论成功构建了2种重组真核表达载体:pcDNA3.1(-)/AIF-1与pEGFP-C1/AIF-1,经转染NIH3T3细胞株获得了AIF-1蛋白的瞬时表达及稳定表达。
付康
程首超
刘收
陈孝平
陆婕
柳欣
陈正望
关键词:
NIH3T3细胞
转染
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