赵洁
- 作品数:1 被引量:3H指数:1
- 供职机构:清华大学深圳研究生院更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- HPV16,18,58-mE67重组腺病毒的构建及克隆表达被引量:3
- 2008年
- 目的构建能同时表达HPV16,18,58三亚型E6-E7优化融合基因的重组腺病毒,为下一步获得适合国情的宫颈癌HPV三价治疗性候选疫苗打基础。方法常规扩增、构建HPV16,18,58的E6-E7融合基因,PCR定点突变消除其转化活性后以IRES相连并重组入pAdeno-X腺病毒载体系统;体外细胞、软琼脂培养及裸鼠成瘤实验检测突变基因转化活性去除情况;重组腺病毒电击转染293包装细胞,Western blot分析外源基因表达情况。结果三型重组融合基因序列与设计完全一致,其中突变基因的转化活性显著降低,Western blot等显示所构建重组腺病毒在293细胞中高效表达外源基因。结论成功构建表达HPV16,18,58三型E6-E7融合基因的重组腺病毒,并有效消除了其转化活性,为下一步疫苗研发打下了基础。
- 杨峥嵘马原栋万骏郑义王海峰赵洁彭扬洋罗海波羊东晔黄来强
- 关键词:人乳头瘤病毒腺病毒