刘明俊
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：湖南师范大学生命科学学院蛋白质化学与发育生物学教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：湖南省教育厅科研基金长江学者和创新团队发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 人HTR1E基因在不同细胞系和多种组织中的表达及其功能
- 2007年
- 人的HTR1E基因是五羟色胺受体(HTR)家族中的一员.这个家族里面的基因都和精神分裂症、抑郁症以及人的自杀活动有关.但是对于其具体的作用机制目前研究不多.采用实时定量PCR方法分析了HTR1E基因在各个组织和不同细胞系中的表达情况,亚细胞定位发现HTR1E位于细胞膜上,萤光素酶实验分析确定HTR1E可以抑制原癌基因erbB2启动子的转录活性.这些研究结果为进一步研究HTR1E基因在疾病发生中的作用奠定了一定的基础.
- 吴艳阳孙一兵刘如石甘露刘明俊贺爱兰胡翔周建林张健
- 关键词：表达谱实时定量PCR转录活性
- uPA基因重组GFP-腺相关病毒载体质粒的构建及其表达
- 2007年
- 利用基因重组技术,用RT-PCR法从幼鼠肾脏获得uPA cDNA,再克隆到质粒pAAV-IRES-hrGFP的多克隆位点,构建重组质粒pAAV-hrGFP-uPA,通过酶切和DNA测序鉴定重组质粒的正确性.采用磷酸钙共沉淀法,以重组质粒pAAV-hrGFP-uPA和pAAV-RC、pHelper共转染AAV-293细胞,产生具有传染性的病毒颗粒;用斑点杂交法测定重组病毒颗粒的滴度,再将此病毒颗粒体外转染到培养的肾小管细胞中,倒置荧光显微镜观察GFP的表达,用免疫组化法检测转染的uPA蛋白表达.结果表明:成功地构建uPA基因GFP-腺相关病毒重组质粒,病毒滴度达每mL 4×1013病毒颗粒,60%～70%肾小管细胞感染了病毒颗粒,感染的肾小管细胞能稳定、高效表达外源uPA蛋白,为今后建立AAV-uPA基因治疗肾纤维化的模型奠定了良好的基础.
- 毕凌云易著文彭海宁刘明俊刘喜红何庆南党西强吴小川莫双红
- 关键词：UPAGFP腺相关病毒载体
