王华林
- 作品数：3 被引量：29H指数：3
- 供职机构：陕西中医药大学药学院更多>>
- 发文基金：陕西省中医药管理局科研基金陕西省教育厅科研计划项目国家自然科学基金更多>>
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- 基于TLR4-NF-κB的柴胡黄芩水煎液抑制CCl4诱导大鼠肝星状细胞激活作用机制研究被引量：10
- 2017年
- 目的探讨柴胡黄芩水煎液(CQ)对CCl_4诱导肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)激活的作用及机制。方法取对数生长的HSC,在无血清培养基中培养24 h后,以1.5×10~9·L^(-1)浓度接种到培养板中过夜。实验分组如下:空白对照组(无药物处理),CCl_4诱导组(6 mmol·L^(-1)CCl_4作用6 h),给药组(6 mmol·L^(-1)CCl_4作用6 h后,再用400、500、600 mg·L^(-1)的CQ作用24 h),TLR4阻断剂TAK-242、NF-κB阻断剂BAY 11-7082组(6 mmol·L^(-1)CCl_4作用6 h后,再用TAK-242 10 mol·L^(-1)、BAY 11-7082 2 mol·L^(-1)作用24h)。处理之后,应用ELISA法检测培养基中透明质酸酶(hyaluronidase,HA)、层黏连蛋白(laminin,LN)、Ⅲ型前胶原(procollagenⅢ,PCⅢ)、Ⅳ型胶原(collagen typeⅣ,Ⅳ-C)浓度,RT-PCR方法检测细胞中Toll样受体4(Toll-like receptors4,TLR4)、核转录因子κB(NF-κB)基因的表达,应用Western blot法检测细胞中TLR4、NF-κB蛋白的表达。结果研究发现,与CCl_4干预组比较,CQ量效相关性降低CCl_4诱导的HSC增殖。600 mg·L^(-1)的CQ可以明显降低HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C细胞释放水平及TLR4、NF-κB基因、蛋白的表达。NF-κB抑制剂TAK-242、BAY 11-7082也可降低CCl_4造成的HSC增殖,HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C细胞释放水平及NF-κB基因、蛋白表达,不能下调TLR4基因、蛋白表达。结论 CQ可以抑制CCl_4诱导的炎症因子基因、蛋白表达,减轻肝纤维化相关指标的含量,其作用机制可能与TLR4-NF-κB转录活性及蛋白活性相关,提示其在抗肝纤维中的作用及机制。
- 李敏韩艳王华林王義雯李静王斌
- 关键词：HSCCCL4诱导NF-ΚB
- 大鼠背根神经节细胞中TRPV1与cAMP/PKA通路调控机制研究被引量：5
- 2018年
- 目的探讨大鼠背根神经节细胞中,辣椒素受体(transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1)与体内cAMP/PKA信号通路的调控作用。方法分离培养大鼠背根神经节原代细胞,分别应用cAMP/PKA信号通路的激动剂8-Br-cAMP和抑制剂H-89,TRPV1的激动剂辣椒素(capsaicin)、抑制剂i RTX进行干预,应用定量PCR和Western blot检测各组细胞的TRPV1、p-PKA的基因和蛋白表达,探讨TRPV1与体内cAMP/PKA信号通路之间的调控机制。结果与空白对照组比较,8-Br-cAMP组、capsaicin组TRPV1的基因及蛋白表达均明显增强,iRTX组TRPV1的基因及蛋白表达明显降低,H-89组TRPV1基因、蛋白的表达无明显变化;8-Br-cAMP组p-PKA的基因及蛋白表达明显增强,H-89组p-PKA的基因及蛋白表达明显降低,而capsaicin组、iRTX组p-PKA基因、蛋白的表达无明显变化。结论 cAMP-PKA信号通路是调控TRPV1表达的重要作用机制之一,同时可能存在其他信号通路对TRPV1也有一定调控作用。
- 高峰卢伟龙王华林吴媛媛王斌李敏
- 关键词：大鼠背根神经节原代细胞TRPV1
- 柴胡皂苷d-黄芩苷配伍对CCl4诱导大鼠HSC的TLR4-NF-κB通路作用研究被引量：15
- 2018年
- 目的:探讨柴胡皂苷d-黄芩苷(SaikosaponinD-Baicalin,SB)对CCl4诱导肝星状细胞(Hepatic stellate cell,HSC)的作用机制。方法:HSC分空白对照(无药物处理),CCl4诱导(6mmol/L CCl_4作用6h),给药(6mmol/L CCl4作用6h后,2.5、5、10ug/ml的SB作用24h),TAK-242、BYA 11-7082组(6mmol/L CCl_4作用6h后,TAK-242 10mol/L、BYA 11-7082 2mol/L作用24h)。ELISA法检测透明质酸酶(Hyaluronidase,HA)、层粘连蛋白(Laminin,LN)、III型前胶原(ProcollagenⅢ,PCIII)、IV型胶原(Collagen Type IV,IV-C)浓度,RT-PCR、Western blot方法检测细胞中Toll样受体4(Toll-like receptors4,TLR4)、核转录因子(NF-κB)基因、蛋白的表达。结果:与CCl4干预组比较,SB、TAK-242、BYA 11-7082可降低CCl4造成的HSC细胞增殖,HA、LN、PCIII、HA细胞释放水平及NF-κB基因、蛋白的表达。SB、TAK-242可下调TLR4基因、蛋白表达。结论:SB可以抑制CCl4诱导的炎症因子基因、蛋白表达,改善肝纤维化相关指标,其作用机制可能与TLR4-NF-κB转录活性及蛋白活性相关。
- 李敏高凯王华林王義雯李静王斌
- 关键词：肝星形细胞CCL4诱导
