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石小青
作品数:
1
被引量:0
H指数:0
供职机构:
西北农林科技大学生命科学学院
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发文基金:
国家自然科学基金
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项
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相关领域:
生物学
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合作作者
陈鹏
西北农林科技大学生命科学学院
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作者
1篇
陈鹏
1篇
石小青
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西北农业学报
年份
1篇
2011
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抗自溶烟草蚀纹病毒蛋白酶的原核表达和纯化及活性分析
2011年
利用QuikChangeSite-Directed Mutagenesis Kit将自溶性烟草蚀纹病毒蛋白酶(tobacco etch virus Protease,TEVP)219位的Ser(S)突变为Val(V),经测序验证的S219V突变质粒pMAL-TEVPS219V电转化大肠杆菌BL21Star(DE3),并优化异丙基硫代β-D半乳糖苷(IPTG)诱导浓度、温度、时间对TEVP表达的影响。结果表明,突变的TEVP表达最适条件为24℃,0.75mmol/L IPTG诱导11h。经金属离子螯合层析纯化得到高纯度,高活性的突变TEVP蛋白酶,比活力为1 048U/mg。每升菌液可纯化17.2mg目标蛋白。
陈鹏
石小青
关键词:
原核表达
定点突变
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