李道明
- 作品数:3 被引量:3H指数:1
- 供职机构:苏州大学附属第一医院更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- HVEM在人CD4^+CD25^+调节性T细胞上的表达及功能研究被引量:1
- 2009年
- 研究单纯疱疹病毒侵入介质(herpesvirus entry mediator,HVEM)在人CD4^+CD25^+调节性T细胞(Treg)上的表达及对Treg功能的影响。分离人外周血单个核细胞,磁珠纯化获得T细胞及其不同亚群,流式细胞术检测Treg上HVEM的表达。Treg按不同比例分别与去除Treg的CD3^+T细胞、CD4^+CD25^-T细胞或CD8^+T细胞混合培养,加入抗HVEM抗体或同型对照抗体,并用CD3抗体单独或联合CD28抗体刺激T细胞,MTT法检测T细胞增殖。结果显示,Treg上HVEM表达量为90%~95%(n=15)。抗HVEM抗体组与对照组相比,降低了Treg对各类T细胞增殖的抑制作用(P<0.05),证明Treg表达的HVEM介导了其发挥抑制功能。
- 王月颖张世杰李道明陈曦邵毅张学光顾宗江
- 关键词:CD4+CD25+调节性T细胞HVEM免疫抑制
- 抗人4-1BB功能性单克隆抗体的研制及生物学特性研究
- 2007年
- 研制鼠抗人4-1BB功能性单克隆抗体及其在T细胞活化、增殖及信号转导中的作用。以小鼠肾肿瘤细胞转染人4- 1BB基因的细胞株4-1BB/293T为免疫原.采用B淋巴细胞杂交瘤技术,获取分泌特异性4-1BB单抗的杂交瘤细胞株。以体内诱生法产生腹水,Protein G亲和层析法进行纯化,快速定性试纸法鉴定单抗的亚类,MTT法检测单抗对T细胞的刺激作用,流式法检测单抗对T细胞凋亡的影响。结果显示:成功获得1株持续分泌特异性抗人4-1BB单抗的细胞株(命名为5D5).属于IgG2b。该单抗能特异识别人4-1BB分子,介导有效的共刺激信号,体外促进T细胞的增殖,抑制活化诱导的T细胞凋亡。总之,成功获得1株功能性4-1BB单抗,具有重要的研究和潜在应用价值。
- 田晓静周春刚李道明徐颖於葛华张学光顾宗江
- 关键词:4-1BB单克隆抗体T细胞
- 人VSIG4-Fc融合蛋白的表达及其生物学活性的研究被引量:2
- 2009年
- 为获取人VSIG4-Fc融合蛋白,并研究其对T细胞的调节效应。首先采用PCR获取人VSIG4基因的胞外段序列及人IgG1Fc恒定区序列,将两者顺次连接插入逆转录病毒载体,以293T为包装细胞,制备含病毒颗粒的培养上清,反复感染CHO细胞,Zeocin筛选能稳定分泌VSIG4-Fc蛋白的基因转染细胞并以RT-PCR、Dot-blot及Western blot等鉴定。以MTT和ELISA分别检测VSIG4-Fc融合蛋白对T细胞增殖及IL-2分泌的影响。结果成功获取了CHO基因转染细胞,该细胞能稳定分泌VSIG4-Fc蛋白,纯化后的VSIG4-Fc蛋白能与T细胞表面未知受体结合,并具有体外抑制T细胞增殖、活化和IL-2分泌的作用。
- 张世杰王蕾王月颖李道明朱守兵蒋玉平蒋靓张学光顾宗江
- 关键词:逆转录病毒融合蛋白共刺激分子