王昆
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：黑龙江大学生命科学学院微生物黑龙江省高校重点实验室更多>>
- 发文基金：教育部留学回国人员科研启动基金黑龙江省普通高校骨干教师创新能力资助计划黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程更多>>
- 杆状病毒介导的哺乳动物细胞基因转移及其影响因素被引量：1
- 2009年
- 杆状病毒作为优良的哺乳动物细胞基因转移载体已在基因治疗、疫苗开发、药物筛选以及基因调控研究等方面发挥巨大作用。但杆状病毒对哺乳动物细胞的嗜性不够广泛、转导效率和转基因表达水平偏低,以及表达持续时间短暂等问题制约其进一步发展,因此如何突破这个制约的瓶颈成为学者们新的关注焦点。针对以上问题,围绕杆状病毒介导哺乳动物细胞基因转移的各种影响因素进行综述。
- 李梅王昆葛菁萍高冬妮楼庄伟平文祥
- 关键词：基因转移哺乳动物细胞
- 应用数学统计法优化副干酪乳杆菌HD1.7固定化细胞制备和产细菌素发酵
- 2009年
- 【目的】应用数学统计法对副干酪乳杆菌HD1.7的固定细胞制备和发酵条件进行优化,以提高细菌素产量。【方法】用26-2部分因子分析法筛选对细菌素产量影响显著的因子,发现海藻酸钠浓度、接种量和发酵时间对细菌素的产生影响显著。利用最陡爬坡法逼近最大响应区域。用Box-Behnken设计确定最佳海藻酸钠浓度、接种量和发酵时间,并进行分批重复发酵。【结果】固定化生产细菌素的最佳条件是海藻酸钠浓度2.8%、CaCl2浓度5%、固定化时间4h、菌体包埋量1/20、发酵时间63h和固定化细胞的接种量8.2%,在此基础上用固定化细胞进行分批重复发酵,每批细菌素的发酵周期为24h。【结论】通过对固定化细胞制备和发酵条件的优化,固定化细胞在327h的分批重复发酵中细菌素的总体产量比游离细胞提高了19%,发酵液中无明显细胞渗漏现象且实现了细胞的重复利用,为细菌素的进一步研究和最终提取奠定了基础。
- 陈建伟李秀凉殷博刘国明王昆平文祥
- 关键词：固定化细菌素
- 腺病毒反向重复序列ITRs的人工合成与克隆
- 2009年
- 为获得高GC含量(72%)的腺伴随病毒AAV反向末端重复序列ITRs(178 bp),以自行设计的4段寡核苷酸引物(约59 bp)为模板,采用融合PCR方法将其人工合成。回收目的片段后,通过TA克隆、PCR和酶切鉴定获得8个阳性转化子。经测序鉴定,得到了5个序列完全正确的克隆。本实验为研究含有ITRs的重组杆状病毒介导外源基因在哺乳动物细胞中表达持续时间的影响奠定了基础。
- 王昆葛菁萍李梅隋栋高冬妮楼庄伟平文祥
- 关键词：PCR基因合成
