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甲苯生物降解的关键酶基因克隆及表达: 2012年; 目的:克隆、表达恶臭假单胞菌生物降解甲苯的关键酶基因。方法:恶臭假单胞菌WZ-1在含甲苯的MS培养基中培养以鉴定其降解甲苯的能力。设计引物扩增甲苯生物降解的关键酶——甲苯双加氧酶和邻苯二酚1,2双加氧酶基因,PCR扩增目的片段后进行T-A克隆,筛选阳性克隆并鉴定。构建甲苯双加氧酶-pET28a进行体外诱导表达。结果:恶臭假单胞菌WZ-1在含甲苯的MS培养基的生长曲线证明其具有降解甲苯的能力;通过重组技术获得阳性克隆,并以酶切、DNA测序进行鉴定;IPTG诱导后获得重组甲苯双加氧酶的高表达。结论:成功获得了用于降解甲苯的甲苯双加氧酶基因和邻苯二酚1,2双加氧酶基因,并在体外诱导表达了目的蛋白,为后续利用模式生物对苯系物的生物降解建立了实验基础。; 杨凯缪晓燕陈琼斯章婷婷叶薇吕建新; 关键词：恶臭假单胞菌甲苯克隆原核表达

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杨凯