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涂晶晶
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1
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供职机构:
江苏大学临床医学院
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发文基金:
江苏省自然科学基金
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相关领域:
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合作作者
张嘉文
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江苏大学临床医学院
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2016
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hTERT启动表达VacA基因的重组杆状病毒载体的构建
2016年
目的构建人端粒酶逆转录酶启动子(hTERT)调控的、携带幽门螺杆菌细胞空泡毒素A(Vacuolatingcytotoxin A,VacA)基因的选择性表达重组杆状病毒。方法应用酶切、连接方法将hTERT连接于杆状病毒穿梭质粒pFastBac^(TM)DUAL载体P10启动子序列之后,和SV40分别调控目的基因VacA的表达和终止;将重组穿梭质粒电转入DH10Bac^(TM)E.coli感受态细胞,经转座重组获得重组杆粒Bacmid-VacA。利用脂质体Cellfectin~将重组杆粒转染Sf9昆虫细胞,包装重组杆状病毒。结果应用PCR验证、双酶切分析、序列测定等方法验证重组质粒基因片段连接正确无突变,通过转座重组获得携带有VacA基因片段的重组杆粒。结论携带VacA基因的选择性复制重组杆粒成功构建。
罗彩凤
涂晶晶
张嘉文
邵世和
朱虹
关键词:
杆状病毒
人端粒酶逆转录酶启动子
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