王忠
- 作品数：16 被引量：72H指数：5
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- 野生茄子cDNA-AFLP分析体系的优化和建立被引量：3
- 2012年
- 以高抗黄萎病的野生茄子托鲁巴姆的根为试材,对影响cDNA-AFLP分析体系的6个关键因素进行分析,以期建立适宜茄子的cDNA-AFLP分析体系,并得到清晰可辨的cDNA-AFLP图谱。结果表明:采用改良的Trizol法提取的RNA较完整,纯度较高;置换合成法合成双链cDNA成本低且效率高;连接产物取原液作为预扩增反应的模板,预扩增产物稀释50倍作为选择性扩增的模板,在25μL反应体系中加入2μL的MgCl2(25mM)和0.2μL的dNTPs(10mM),可以获得带型丰富且重复性好的结果。
- 王忠杨清汪仁郑玉红
- 关键词：茄子CDNA-AFLP
- 南方红豆杉假种皮变异品系的鉴定及生理生化特性被引量：3
- 2015年
- 以假种皮自然变异为黄色的南方红豆杉及其原种为对象,结合ITS序列分析变异品系与近缘类群的亲缘关系,并对变异品系和原种的部分生理生化指标进行比较。ITS序列比对结果显示,变异品系和原种的遗传距离最近,且在遗传进化树上聚为一类,表明黄色假种皮的南方红豆杉由红色假种皮的南方红豆杉自然变异而来。除可溶性糖含量外,变异品系叶片中紫杉醇和丙二醛的含量,SOD、CAT、POD、PAL等酶的活性均显著或极显著高于原种,其中变异品系中紫杉醇的含量是原种的1.7倍。研究结果可为红豆杉属植物品种的鉴定以及红豆杉新品种的选育提供重要依据。
- 徐敏王忠秦亚龙何树兰朱波风陆波仲秀林彭峰
- 关键词：南方红豆杉原种变异品系生理生化特性
- 洋葱细胞质雄性不育系70及其保持系71基因组DNA的RAPD分析被引量：4
- 2006年
- 采用RAPD技术,对洋葱细胞质雄性不育系70及其保持系71的基因组DNA的多态性进行分析。结果表明,在被检测的100条随机引物中,46条引物具有扩增产物,5条引物扩增出多态性条带。对这5条引物进行重复筛选和单株验证,只有G02扩增出的多态性片段,且表现稳定。推测该标记与育性有关。
- 李园园王忠梁峰沈丽珍严继勇杨清
- 关键词：洋葱细胞质雄性不育基因组DNA
- 野生茄子黄萎病病程相关基因StDAHP的克隆与表达分析被引量：11
- 2010年
- 采用RACE和同源序列克隆技术,从野生茄子托鲁巴姆(Solanum torvum)中克隆得到一个DAHP同源基因,命名为StDAHP基因,提交至GenBank,登录号为GU479467。生物信息学分析表明:StDAHPcDNA含有一个1683bp的开放阅读框,编码一个由560个氨基酸残基组成的蛋白,该蛋白分子量为62.53kDa,等电点为9.1。采用DNAMAN软件对StDAHP和其他同源蛋白的氨基酸序列比对,结果表明:该蛋白与来自马铃薯、番茄、烟草和水稻4种植物的同源蛋白在氨基酸水平有较高的一致性;且在靠近N-末端和C-末端的氨基酸都比较保守。采用半定量RT-PCR方法对StDAHPmRNA水平进行了分析,结果显示:StDAHP属于诱导表达,在病原菌侵染后期维持较高水平。
- 王忠谢超决登伟黄乐平黄全生杨清
- 关键词：SOLANUM克隆
- 红外线CO2气体分析仪测定光呼吸的方法
- 王忠高煜
- 关键词：光呼吸作用测量方法气体分析器光合作用
- 水茄果实总RNA提取方法的比较分析被引量：1
- 2016年
- 水茄果实中富含多糖、蛋白、色素和其他代谢物质,影响其总RNA提取的质量。本研究中比较Trizol法、改良Trizol法、改良CTAB法和两种试剂盒法5种方法提取的水茄果实总RNA,用琼脂糖凝胶电泳检测总RNA的完整性,Onedrop光谱仪检测总RNA的浓度和纯度。结果表明:改良Trizol法最为有效,该方法提取的总RNA在琼脂糖凝胶上得到清晰的28S和18S条带,OD260nm/OD280nm值在1.82.1之间、OD260nm/OD230nm的比值大于2.0;改良CTAB法获得的RNA质量较好,但步骤较为繁琐,耗时长;Trizol法和试剂盒法得到总RNA浓度较低。RT-PCR试验进一步表明,以改良Trizol法获得的总RNA可用于基因分离,所得条带清晰,与目的片段大小一致且比对正确。
- 秦亚龙王忠徐敏郑玉红束晓春彭峰
- 关键词：果实总RNA
- 黄萎病菌胁迫下野生茄子托鲁巴姆防卫反应的生理生化分析被引量：9
- 2011年
- 以野生茄子托鲁巴姆(Solanum torvum Swartz)和苏崎茄(Solanum melongena L.)为主要材料,通过比较两种茄子在大丽轮枝菌(Verticillium dahliae Kleb)侵染过程中体内的生理生化指标变化,分析托鲁巴姆对黄萎病的抗性响应机制。结果表明:(1)与苏崎茄植株相比,托鲁巴姆植株表现出很强的自我防御和自我修复能力。(2)托鲁巴姆体内存在的活性氧清除系统(如SOD、POD、CAT等酶的活性)高于苏崎茄;在侵染后,托鲁巴姆体内各种酶的活性快速增加,其幅度高于苏崎茄;MDA的变化则恰恰相反。这个结果提示,黄萎病菌胁迫可能激活了托鲁巴姆体内活性氧清除系统,从而加快了某些防御物质(如木质素和抗菌物质绿原酸等)的形成,同时减缓或降低MDA等有害物质在植株体内的积累。(3)黄萎病菌侵染后各生理指标的响应时间表现出差异。托鲁巴姆中POD、PAL的活性和可溶性蛋白含量在侵染后的12h内就迅速作出响应(POD增加、PAL和可溶性蛋白减少);而SOD、PPO、CAT的活性和MDA的含量则在处理后初始阶段(至少12h)进行了一些调整,随后才进入持续性的增加或减少阶段。由此可见,托鲁巴姆对黄萎病病菌侵染的响应具有时序性,其体内POD酶、PAL酶和可溶性蛋白首先参与植物的防卫反应以应对黄萎病的胁迫,其它酶随后参与响应,它们的共同作用形成对黄萎病菌的有效防卫。
- 王忠杨清
- 关键词：托鲁巴姆黄萎病
- 细胞壁矿质元素含量在细胞生长中的动态变化(英文)
- 2008年
- 在组织水平上已经描述了许多植物通气组织的形成过程,但对其发育过程的调控仍然知道得很少.利用CSEM-EDX微量分析技术,定点测量慈姑叶柄通气组织不同发育时期的细胞壁矿质元素的组成.这些元素除了C,O以外,还包括Mg,Ca,Cu,Zn,P等必需的矿质元素.结果发现,在叶柄发育的早期,通气组织细胞壁的K和Cl含量很高,分别高达36%和4.3%细胞壁干重.Mg的含量在第二阶段最高,达到细胞壁干重的0.86%.只有在第三和第四阶段监测到Cu和Zn元素,最高含量分别为2.5%和1.5%细胞干重.仅在第四和第五阶段才能检测到Ca,其最高含量为1.3%细胞壁干重.通气组织横膈膜细胞和圆柱体腔壁细胞的元素构成变化有相似的趋势,说明这种变化与组织的发育阶段关系密切.细胞壁的一些元素间呈现较高的相关性,其中K和Cl及Cu和Zn之间成较高的正相关.在不同发育阶段,细胞壁的元素含量呈现动态变化,说明细胞壁(质外体物质)的元素构成有很大的变动范围.早期的通气组织细胞壁大量积累K和Cl,暗示早期的气体空间充满液体(组织液);Mg可能参与细胞伸展的调控;伸展中细胞的细胞壁积累高浓度的Cu和Zn,并不影响细胞的正常功能;而Ca的出现使细胞比硬度增加,将终止细胞伸展.Cu和Zn在细胞壁中的积累呈高度的直线关系,回归分析显示,二者呈现定量关系,推测它们可能有共同的或者类似的转运和吸收机制.
- 梁峰王忠郭建林沈丽珍杨清
- 关键词：通气组织矿质元素
- 野生茄子(Solanum torvum)抗黄萎病相关基因StoVe1的克隆与分析被引量：13
- 2006年
- 采用RT-PCR和RACE技术从野生茄子中扩增克隆到一个抗黄萎病相关基因,命名为StoVe1,其cDNA全长3400bp,含有3153bp的完整开放阅读框,编码1051个氨基酸,该基因编码的蛋白序列与刚果野茄、类番茄和番茄Ve1编码的氨基酸序列同源性分别为82%、81%和80%,且有很高的功能区段保守性。将该cDNA全长序列提交GenBank,登陆号为DQ020574。半定量PCR表明该基因为组成型表达,在根中表达最多,叶中最少。
- 史仁玖殷玥王忠陈敏黄权生黄乐平杨清
- 关键词：野生茄子克隆
- 马铃薯内生细菌StC01的鉴定与促生作用被引量：7
- 2008年
- 从马铃薯组培苗上分离出1株内生细菌StC01,菌体短杆状,菌落呈圆形黄色。经过生理生化鉴定及16S rRNA基因测序鉴定,属于短小杆菌属(Curtobacterium)。对马铃薯组培苗接种培养试验表明,该菌对马铃薯生长有促进作用。接种细菌的马铃薯组培苗培养5周后,平均株高比对照增加17.85%,整株平均鲜重、单株平均地上部分鲜重、根鲜重分别增加17.56%、25.87%和2.26%。整株干重、地上部分干重、根部干重增加24.46%、38.13%和1.67%。
- 沈丽珍梁峰王忠王全逸陈敏杨桂娟杨清
- 关键词：马铃薯内生细菌促生作用
