裴秀英
- 作品数:165 被引量:363H指数:10
- 供职机构:宁夏医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金宁夏回族自治区科技厅科技攻关项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- POMC神经元Isl1基因条件性敲除小鼠模型构建及表型分析
- 2023年
- 目的构建POMC神经元上Isl1基因条件性敲除小鼠模型,并初步分析其表型。方法利用Cre/loxP系统构建条件性基因敲除小鼠模型,通过Isl1flox/+自交获得Isl1flox/flox小鼠,再将Isl1flox/flox小鼠与POMCCre基因型小鼠交配得到POMCCre;Isl1flox/+雄鼠,POMCCre;Isl1flox/+雄鼠再与Isl1flox/flox雌鼠交配,通过PCR进行基因型鉴定,得到POMC神经元上Isl1条件性敲除小鼠(POMCCre;Isl1flox/flox,缩写为Isl1ΔPOMC),免疫印迹法验证其敲除效率。通过功能学及组织病理学方法,观察主要组织器官是否存在自发病变。结果成功构建了Isl1ΔPOMC小鼠,Isl1ΔPOMC小鼠下丘脑弓状核中ISL1敲除效率>90%(P<0.05),其他组织中ISL1表达水平无变化(P>0.05),证明POMC神经元Isl1基因敲除小鼠模型构建成功。Isl1ΔPOMC小鼠呈现青春期后自发性进行性肥胖、代谢综合征及生育能力障碍等表型。结论应用Cre/loxP技术成功构建了POMC神经元Isl1基因条件性敲除小鼠,为研究Isl1在POMC神经元中生物学功能和调控机制提供了重要的动物模型。
- 黄笠纹李雪潘朋歌刘美辰张茜张茜尹海涛裴秀英
- 关键词:生育力
- 冷冻应激对人精子印记基因SNRPN和GRB10的DNA甲基化和表达影响
- 王红燕周雪裴秀英王锐
- α-硫辛酸对小鼠卵巢颗粒细胞氧化应激损伤和凋亡的影响被引量:4
- 2016年
- 目的探讨α-硫辛酸对小鼠颗粒细胞培养过程中抗氧化水平和抗凋亡水平的影响。方法收集经PMSG处理的小鼠卵巢颗粒细胞,经原代培养24h后,添加终浓度为100μmol/L的α-硫辛酸继续培养24h,测定氧化水平SOD、MDA和GSH-Px参数,评价抗氧化能力,采用Trizol法提取各组细胞的RNA,进行RT-PCR法检测α-硫辛酸对caspase-3和caspase-9基因的表达情况的影响,同时利用细胞免疫荧光和ELISA法检测caspase-3和caspase-9蛋白表达,并分析α-硫辛酸降低细胞凋亡的作用。结果分离培养的小鼠卵巢颗粒细胞α-硫辛酸添加后,SOD和GSH-Px活性升高,MDA含量降低(P<0.05);经过RT-PCR扩增技术获得长度为180bp的特异性caspase-3产物,获得长度为152bp的特异性caspase-9产物,α-硫辛酸添加可显著性降低caspase-3和caspase-9mRNA的表达(P<0.05);免疫荧光细胞化学染色显示颗粒细胞caspase-3和caspase-9蛋白阳性染色定位于细胞胞质,分别呈现绿色荧光和红色荧光,细胞核呈蓝色荧光;ELISA结果显示α-硫辛酸添加后caspase-3和caspase-9酶活性显著下调(P<0.05)。结论小鼠颗粒细胞培养过程中添加α-硫辛酸可明显改变细胞抗氧化能力,对卵巢颗粒细胞培养过程中的氧化应激诱导的细胞凋亡起到一定的保护作用。
- 马会明张永芳王蒙蒙李昕王永峰田洪成裴秀英王燕蓉
- 关键词:Α-硫辛酸氧化应激卵巢颗粒细胞小鼠
- 小鼠卵巢玻璃化冻融过程中FSH干预对血管生成相关因子表达的影响被引量:2
- 2015年
- 目的在小鼠卵巢玻璃化冻融过程中给予重组人卵泡雌激素(r FSH)干预,通过观察其对卵泡刺激素受体(follicle-stimulating hormone receptor,FSH-R)及与血管生成相关的Integrinαvβ3、Angpt-2、Kindlin-2蛋白表达的影响,提供FSH干预对卵巢血管生成相关因子影响的依据。方法将4周龄C57BL/6J小鼠卵巢随机分为新鲜对照组(FCG)、玻璃化冻存对照组(VCG)、0.3IU·m L-1FSH干预玻璃化冻存组(FSH-VG)。对3组卵巢内各级卵泡进行计数;通过免疫组化方法观察并分析各组FSH-R、Angpt-2、Kindlin-2在卵巢不同细胞中的定位;观察粘附分子Integrinαvβ3在各组卵巢细胞中表达,并进行亚基表达量的分析。结果FSH-VG组的原始卵泡、初级卵泡、正常卵泡及总卵泡数均高于VCG组,但低于FCG组(P均<0.05),闭锁卵泡数VCG组高于FCG及FSH-VG组(P均<0.05);FSH-R与Angpt-2阳性表达呈现FSH-VG与VCG组均低于FCG组(P<0.05),但FSH-VG组高于VCG组(P<0.05);Kindlin-2阳性表达在FSH-VG组与FCG组之间差异无统计学意义(P>0.05),但均高于VCG组(P<0.01或<0.05);Integrinβ3蛋白表达量FCG与FSH-VG组间差异无统计学意义(P>0.05),但均高于VCG组(P<0.05),Integrinαv的表达3组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论玻璃化冻融过程中添加FSH可以上调FSH-R及粗血管生成的相关因子Integrinβ3、Angpt-2和Kindlin-2蛋白的表达,提高正常卵泡数。
- 张红马文叶杨延周裴秀英常青马会明马文智孙苗于佳蔡玉芳王红燕黑常春赵承军孔斌王燕蓉
- 关键词:小鼠卵巢RFSH玻璃化冻存ΑVΒ3
- FSH体外干预小鼠卵巢后DGE表达谱的建立及初步分析被引量:2
- 2017年
- 本研究利用数字基因表达谱技术,构建FSH体外干预小鼠卵巢12 h后的DGE差异基因表达谱,并对差异表达基因进行GO功能和Pathway信号通路分析。发现FSH干预培养12 h组(FA)和无FSH干预培养12 h组(NA)之间存在显著差异基因256个,其中上调基因34个,下调基因222个。对差异表达基因功能注释分析表明,在体外干预培养小鼠卵巢的过程中,FSH主要对小鼠卵巢生殖相关的细胞元件生成、生殖结构发育、核糖体生成、性腺发育、雌性性腺发育等GO功能类基因有一定影响,并通过趋化因子、Erb B、促性腺激素释放素、粘着斑、血管内皮生长因子、神经营养蛋白因子等信号通路干预小鼠卵巢体外培养。
- 马春骥张晓光裴秀英王燕蓉
- 关键词:小鼠卵巢FSH
- PTEN、PIK3CA在前列腺癌组织中的表达及其临床意义被引量:2
- 2016年
- 目的探讨抑癌基因PTEN及癌基因PIK3CA在人前列腺癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学染色的方法检测40例前列腺癌和40例良性前列腺增生石蜡组织中PTEN蛋白和PIK3CA蛋白的表达水平;应用实时荧光定量PCR法及Western blot法检测15例新鲜前列腺癌组织和15例新鲜良性前列腺增生组织中PTEN和PIK3CA基因m RNA及蛋白的表达水平。结果 (1)免疫组化结果显示,PTEN蛋白在前列腺癌组中表达的阳性率(35.0%)低于良性前列腺增生组(90.0%)(P<0.01);前列腺癌组和良性前列腺增生组患者的PIK3CA蛋白表达阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)。(2)术前PSA水平<20 ng·m L-1、病理分级为G1+G2级、临床分期为Ⅱ期以及无远处转移的前列腺癌患者PTEN蛋白的阳性表达率更高(P<0.05),PTEN蛋白与前列腺癌术前PSA水平(r=-0.471)、病理分级(r=-0.313)、临床分期(r=-0.348)以及是否远处转移(r=-0.424)均呈负相关(P<0.05)。(3)实时荧光定量PCR和Western blot检测显示,良性前列腺增生组PTEN m RNA相对表达量和PTEN蛋白表达量均高于前列腺癌组(P<0.05);两组PIK3CA m RNA相对表达量和PIK3CA蛋白表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PTEN的低表达与前列腺癌的生物学行为密切相关,PTEN的表达水平对判断前列腺癌的分期及预后有重要的参考价值。
- 马良宏张强田洪成刘政李培军裴秀英王燕蓉
- 关键词:前列腺癌良性前列腺增生PTENPIK3CA
- 枸杞明目胶囊安全性研究
- 2001年
- 目的 研究枸杞明目胶囊的安全性。方法 小鼠急毒性试验及大鼠长期毒性试验。结果 小鼠急性毒性LD50 大于 90 .0ml/ (kg·bw)。大鼠 30天喂养试验 ,未见动物出现行为、体重、血象、肝、肾功能等的毒性变化 ,组织切片也未见各组之间、两种性别之间脏器结构有明显差异。
- 芦晓红朱培成裴秀英杨怡孙伟杨文君
- 关键词:枸杞毒理学胶囊
- 模板DNA质量对单核苷酸多态性分析的影响被引量:3
- 2009年
- 目的探索在单核苷酸多态性分析中模板DNA质量对实验的影响以及提高模板DNA质量的途径。方法用PCR-RFLP法研究SNP rs1024611(G/A)的基因分型,从样本保存方式、保存时间及DNA提取方法三方面进行对比实验,观察其对模板DNA质量及SNP分析的影响。结果从抗凝血中提取DNA模板的得率比非抗凝血高,在SNP分析中,EDTA抗凝血效果最好、肝素抗凝血效果不好;基因组DNA在全血中的有效保存时间比提纯的DNA有效时间长;试剂盒法提取DNA的得率和纯度均高于传统的酚-氯仿法。结论可通过以下途径提高SNP研究中DNA模板的质量:采集血样用EDTA抗凝、分装成小份在-20℃冻存,避免反复冻融。使用前在37℃水浴中快速解冻,用试剂盒法提取DNA更适合于SNP的研究,提取的模板DNA要及时实验或分装后冻存于-20℃,若需长期保存模板DNA,保存全血优于保存纯化的DNA。
- 张淑雅李岩裴秀英高玉婧刘芳蒋学锋董晓薇随瑞枝
- 关键词:单核苷酸多态性
- 阅读蛋白Prrc2a在雌性生殖干细胞分化过程中的应用
- 本发明公开了一种阅读蛋白Prrc2a在雌性生殖干细胞分化过程中的应用,本发明通过对肉苁蓉多糖处理促进雌性生殖干细胞体外分化机制研究,发现m<Sup>6</Sup>A甲基化在此过程中的作用,并筛选出关键基因‑Prrc2a(...
- 裴秀英俞晓丽张彦平邱意开常青刘心蕊李进花孙伟玮
- 一种诱导人多能干细胞体外分化为停滞在减数分裂II期的卵母细胞的方法
- 本发明公开了一种诱导人多能干细胞体外分化为停滞在减数分裂II期的卵母细胞的方法,该方法分为三步,首先将细胞密度为80%的多能干细胞更换PGC‑m培养基,于35~40℃、3%~6%CO<Sub>2</Sub>下培养10天,...
- 俞晓丽王宁王翔任亚辉王华岩张樱馨邱意开蒲静刘心蕊裴秀英王燕蓉