赵丹 作品数:41 被引量:203 H指数:7 供职机构: 中国医科大学附属第一医院 更多>> 发文基金: 辽宁省自然科学基金 教育部留学回国人员科研启动基金 辽宁省科学技术计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 机械工程 文化科学 更多>>
钙网织蛋白重组腺病毒载体构建及体外表达 2012年 目的构建钙网织蛋白(CRT)基因重组腺病毒载体,并检测其在293LP细胞中的表达。方法根据Genbank中提供的CRT基因序列,设计并合成引物,以人乳腺癌组织cDNA文库为模板采用RT-PCR技术扩增人CRT基因片段,测序后将CRT基因片段定向克隆至pShuttle-CMV重组穿梭载体,进而将穿梭载体克隆至PacⅠ限制性内切酶线性化的腺病毒载体pAdxsi。结果重组穿梭载体pShuttle-CRT经EcoRI/KpnⅠ酶切鉴定连接成功。酶切穿梭载体将CRT片段克隆至腺病毒载体pAdxsi得到Ad-CRT,鉴定证实Ad-CRT载体构建成功。Ad-CRT转染293LP细胞并通过Western印迹法和Real-time PCR法证实其体外表达。结论成功构建CRT重组腺病毒载体Ad-CRT并证实其在293LP细胞中表达。 赵丹 刘新莉 马萍关键词:腺病毒载体 基因治疗 原发性高血压患者血压变异性及昼夜节律与左室肥厚的关系 被引量:19 2013年 目的探讨原发性高血压患者血压变异性及血压昼夜节律与心室肥厚的关系。方法连续入选2010年8月至2012年1月,于中国医科大学附属第一医院心血管内科住院的原发性高血压患者共93例,根据超声心动图测量指标计算所得的左心室重量指数(LVMI)分为左心室肥厚(LVH)组与无LVH组;再根据24h动态血压监测获得的结果分为血压晨峰组与无血压晨峰组,杓型血压组与非杓型血压组。分析比较24h血压、白昼和夜间血压均值、血压变异性、血压昼夜节律及晨峰与心室肥厚的相关性。结果①与无LVH组相比。LVH组24小时收缩压(24hSBP)、24小时舒张压(24hDBP)、白昼收缩压(dSBP)、白昼舒张压(dDBP)、夜间收缩压(nSBP)和夜间舒张压(nDBP)均升高,P〈0.01;LVH组24小时平均收缩压标准差(24hSSD)高于无LVH组,P〈O.05,但两组24小时平均舒张压标准差(24hDSD)无差别;与无LVH组相比,LVH组夜间收缩压标准差(nSSD)和夜间舒张压标准差(dDSD)升高,P〈0.01;但白昼收缩压标准差(dSSD)和白昼舒张压标准差(dDSD)无差别。②血压晨峰组LVMI高于无血压晨峰组,P〈O.05;血压晨峰组LVH比率也高于无血压晨峰组,P〈0.01;与无血压晨峰组相比,血压晨峰组24hSBP、dSBP和nSBP均增高,P〈0.05,但两组24hDBP、dDBP和nDBP无差别。③杓型血压组LVMI低于非杓形血压组,P〈0.05;杓型血压组LVH比率低于非杓形血压组,P〈0.01;与非杓形血压组相比,杓型血压组nSBP、nDBP均降低,P〈0.01;而两组24hSBP、24hDBP、dSBP、dDBP差异无统计学意义。结论原发性高血压患者LVH的发生与血压变异性和血压晨峰密切相关。具有血压晨峰的患者和血压昼夜节律消失的非杓型高血压患者更易出现LVH。 张子新 赵丹 余陆娇关键词:高血压 动态血压 左室肥厚 血压变异性 昼夜节律 血压晨峰 "五层垫片密封"技术治疗外伤性脑膜脑膨出 目的:外伤性脑膜脑膨出在颅脑外伤中较少见且常备忽视.其主要症状为脑脊液漏,突眼,嗅觉损伤,视力障碍,往往合并脑挫伤、脑内血肿等颅脑外伤表现,严重时可继发脑炎危机生命.目前外伤性脑膜脑膨出手术治疗的指征尚不明确,没有治疗的... 包义君 赵丹 黄小龙 张德威 陶山伟 吴安华 王运杰关键词:创伤性颅脑损伤 脑膜脑膨出 外伤性脑膜脑膨出“五层垫片密封”颅底修补技术 包义君 赵丹 黄小龙 张德威 陶山伟 吴安华 王运杰重组腺病毒载体Ad-CRT/MAGE-A3抑制肺腺癌细胞A549侵袭的体外研究 2012年 目的:探讨同时携带CRT基因及MAGE-A3基因的重组腺病毒载体转染人肺腺癌细胞A549后基因的表达及其对体外增殖、侵袭、凋亡及血管形成能力的影响。方法:Ad-CRT/MAGE-A3转染A549细胞,转染48h后以Western blotting法检测CRT及MAGE-A3蛋白的表达;MTT法检测Ad-CRT/MAGE-A3对A549细胞增殖的影响;Transwell方法检测Ad-CRT/MAGE-A3对A549细胞侵袭的影响;AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测Ad-CRT/MAGE-A3对A549细胞凋亡的影响;小管形成实验检测Ad-CRT/MAGE-A3对血管形成的影响。结果:转染48h,Western blotting结果显示转染Ad-CRT/MAGE-A3的A549细胞能够表达CRT及MAGE-A3蛋白;MTT检测结果显示Ad-CRT/MAGE-A3能够明显抑制A549细胞的增殖;Tran-swell检测结果显示Ad-CRT/MAGE-A3能够明显抑制A549细胞的侵袭能力;AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测结果显示Ad-CRT/MAGE-A3能够诱导A549细胞凋亡;小管形成实验结果显示Ad-CRT/MAGE-A3能够明显抑制血管形成。结论:Ad-CRT/MAGE-A3能够明显抑制A549的增殖及侵袭能力,诱导其凋亡,并能明显抑制血管内皮细胞血管生成,其作用机制可能与CRT及MAGE-A3蛋白同时表达后相互作用有关,提示Ad-CRT/MAGE-A3可以作为潜在的肺癌基因治疗的新方法。 刘新莉 赵丹 李晓曦 王扬 李岩 马萍关键词:CRT 重组腺病毒载体 血管形成 半椎板或椎板间开窗手术:恶性肿瘤适合吗? 包义君 黄小龙 赵丹 官彦雷 张路阳 王维 吴安华 王运杰半椎板或椎板间开窗手术:恶性肿瘤适合吗? 包义君 黄小龙 赵丹 官彦雷 张路阳 王维 吴安华 王运杰重组腺病毒Ad-CRT/MAGE-A3联合表柔比星抑制乳腺癌细胞增殖及侵袭 被引量:1 2012年 目的:构建携带钙网蛋白(calreticulin,CRT)基因和黑素瘤抗原基因-A3(melanoma antigen gene-A3,MAGE-A3)的重组腺病毒载体Ad-CRT/MAGE-A3,观察其联合表柔比星对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖及侵袭的抑制作用。方法:构建Ad-CRT/MAGE-A3载体,感染MDA-MB-231细胞后,荧光显微镜观察其最适感染复数(multiplicity of infection,MOI)。分表柔比星、Ad-GFP、Ad-CRT/MAGE-A3、表柔比星+Ad-GFP、表柔比星+Ad-CRT/MAGE-A3共5组,MTT法检测各组MDA-MB-231细胞的增殖,Transwell实验检测各组MDA-MB-231细胞的侵袭力。结果:成功构建重组腺病毒载体Ad-CRT/MAGE-A3,其感染MDA-MB-231细胞的最适MOI为100。与其他各组相比,应用Ad-CRT/MAGE-A3联合表柔比星能明显抑制MDA-MB-231细胞的增殖[(83.27±1.04)%vs(57.42±1.27)%,(43.26±0.95)%,(61.23±1.47)%,(55.38±1.62)%;P<0.05]和侵袭[(8.41±4.20)vs(14.62±5.33),(107.66±3.35),(100.60±4.42),(104.20±2.60);P<0.05]。结论:腺病毒载体Ad-CRT/MAGE-A3能增强表柔比星抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖及侵袭的能力。 刘新莉 赵丹 李晓曦 李岩 马萍关键词:重组腺病毒载体 表柔比星 乳腺癌 白藜芦醇对乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达的影响 被引量:4 2012年 目的探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡及相关蛋白Bcl-2表达的影响。方法不同浓度白藜芦醇处理人乳腺癌MDA-MB-231细胞,MTT法检测白藜芦醇对细胞增殖抑制率,流失细胞技术检测细胞凋亡,Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bcl-xl、Mcl-1和Caspase-3的表达。结果白藜芦醇25、50、100、200μmol/L处理细胞,增殖抑制率分别为(24.22±1.66)%、(30.79±1.60)%、(45.72±1.25)%和(53.31±1.94)%。白藜芦醇0、50、100、200μmol/L处理细胞,凋亡率分别为(3.53±0.25)%、(28.80±1.34)%、(38.78±1.19)%和(58.96±1.26)%。Western blot结果显示,白藜芦醇处理细胞后,Caspase-3蛋白裂解片段表达增加,凋亡相关蛋白Bcl-2和Bcl-xl的表达减低。结论白藜芦醇能诱导MDA-MB-231细胞凋亡增加,这可能与白藜芦醇激活Caspase-3蛋白同时抑制凋亡相关蛋白Bcl-2和Bcl-xl表达有关。 仇凤启 孙大鹏 赵丹 刘新莉 李岩 马萍关键词:白藜芦醇 乳腺癌 凋亡 凋亡相关蛋白 CASPASE-3 急性创伤性颅脑损伤患者围手术期血糖变化与颅脑损伤严重程度的相关性 被引量:21 2016年 目的探讨急性创伤性颅脑损伤患者围手术期血糖变化与颅脑损伤程度的相关性。方法回顾性分析2012年7月至2015年6月于中国医科大学附属第一医院神经外科住院治疗的125例满足研究标准的急性单发性创伤性颅脑损伤患者的临床资料,根据患者入院时的格拉斯哥昏迷评分(GCS)分组:对照组(GCS15分)、轻型组(GCS13~14分)、中型组(GCS9~12分)、重型组(GCS6~8分)和特重型组(GCS3~5分),入院后即开始进行血糖控制(包括缓解应激因素和应用胰岛素),分别统计患者入院后的每日血糖,然后计算各组在不同时间段内的血糖均数、血糖标准差及血糖变异系数,分析患者血糖变异度和高血糖的持续时间与患者颅脑损伤严重程度的关系。结果同一时间段特重型组和重型组的血糖均数、血糖标准差及血糖变异系数均明显高于对照组(P〈0.05);同一组中,在入院时、入院48h和入院3~7d不同的时间段问,患者的血糖均数、血糖标准差和血糖变异系数均有统计学差异(P〈0.05);特重型组和重型组患者高血糖平均持续时间和意识障碍平均持续时间与对照组相比均有统计学差异(P〈0.05)。秩相关分析表明,血糖整体水平、血糖波动度以及高血糖平均持续时间与患者颅脑损伤严重程度呈正相关(r〉1)。结论急性单发性创伤性颅脑损伤患者血糖变化水平可以作为重型颅脑损伤病情严重程度的评价指标。 包义君 陶山伟 李力卓 张德威 王鹏飞 黄小龙 张文泰 赵丹 王运杰